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來源: 發(fā)布時間:2022-04-11

編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量,。使用紫外可見分光光度計進(jìn)行定量時基于朗伯比爾定律,,測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面,,利用熒光分光光度計時,,使用熒光強(qiáng)度。在低濃度時,,熒光強(qiáng)度與濃度成正比,,所以,可以用于定量,。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液,。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測定結(jié)果,,對兩個機(jī)種的定量,、檢測下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較,下面將進(jìn)行介紹,。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示,。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,,調(diào)配~5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光光譜如圖1所示,根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示,。在圖2中,,用~5ug/ml的6點和空白樣品(蒸餾水)創(chuàng)建,得到了線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(相關(guān)系數(shù)的平方值是),。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,,噪聲的影響相對較大,導(dǎo)致線性較差,。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強(qiáng)度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強(qiáng)度,。測定條件如表2所示。江蘇光度計的市場價格,。上海元析光度計選購

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分光光度計可分為紫外分光光度計,、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計,。項目對分析結(jié)果的影響1,、波長準(zhǔn)確度分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。試劑盒包含一個空白濾光片,、三個檢查光度的濾光片和三個校正波長的濾光片,。每個濾光片的吸光值是相對空白濾光片測定的。這個試劑盒不僅能讓用戶獲得測量準(zhǔn)確性的信息,,也能提供精確度的信息,,包括平均值和變異系數(shù)。陜西火焰分光光度計教程上海光度計的批發(fā)廠家排名,。

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并發(fā)現(xiàn)吸收光譜相似的有機(jī)物質(zhì),,它們的結(jié)構(gòu)也相似。并且,,可以解釋用化學(xué)方法所不能說明的分子結(jié)構(gòu)問題,,初步建立了紫外可見分光光度計的理論基礎(chǔ),以此推動了紫外可見分光光度計的發(fā)展,。1918年美國國家標(biāo)準(zhǔn)局研制成了世界上diyi臺紫外可見分光光度計(不是商品儀器,,很不成熟)。此后,,紫外可見分光光度計很快在各個領(lǐng)域的分析工作中得到了應(yīng)用,。朗伯早在1760年就發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的厚度成正比,后被人們稱之為朗伯定律;比耳在1852年又發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)濃度成正比,,后被人們稱之為比耳定律,。在應(yīng)用中,人們把朗伯定律和比耳定律聯(lián)合起來,,又稱之為朗伯-比耳定律,。隨后,,人們開始重視研究物質(zhì)對光的吸收,并試圖在物質(zhì)的定性,、定量分析方面予以使用,。因此,許多科學(xué)家開始研究以比耳定律為理論基礎(chǔ)的儀器裝置,。經(jīng)過一個漫長的時期后,,美國Beckman公司于1945年,推出世界上diyi臺成熟的紫外可見分光光度計商品儀器,。從此,,紫外可見分光光度計的應(yīng)用開始得到飛速發(fā)展。紫外可見分光光度計的展望紫外可見分光光度計雖然是一類有著很長歷史的分析儀器,,但每一次吸收了新的技術(shù)成果都使它煥發(fā)出新的活力,。

食品微生物檢測關(guān)注了解更多檢測內(nèi)容分光光度計是實驗室常用設(shè)備之一,在食品,、制藥,、環(huán)境、生命科學(xué)等領(lǐng)域都有***的應(yīng)用,。所以實驗室的小伙伴熟悉并掌握其如何使用時非常必要,,而且簡單的故障維修和維護(hù)也要有所了解。***小編把分光光度計使用中的那些事進(jìn)行了總結(jié),,希望能對你有所幫助,。分光光度計是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同,,對不同波長光線的吸收能力也不同,,因此,每種物體都具有特定的吸收光譜,。能從含有各種波長的混合光中,,將每一種單色光分離出來,并測量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計,。分光光度法是比色法的發(fā)展,。比色法只限于在可見光區(qū),分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū),。分光光度法則要求近于真正單色光,,其光譜帶寬比較大不超過3-5nm,在紫外區(qū)可到1nm以下,,來自棱鏡或光柵,,具有較高的精度。分光光度計,?就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,。分光光度計可分為紫外分光光度計,、可見光分光光度計(或比色計),、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計,。項目對分析結(jié)果的影響1、波長準(zhǔn)確度分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長,。上海光度計的價格分析,。

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由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差,。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,,對波長準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,,當(dāng)吸收峰寬度較小,,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意,。2,、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3,、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的,。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,,雜散光的影響也隨之增大,,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,,雜散光的影響更不能忽視,。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標(biāo),。使用與維護(hù)1,、若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,,等燈熱平衡后,,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量,。2,、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上,。若不是這種情況,,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3,、比色皿使用完畢后,,請立即用蒸餾水沖洗干凈,,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,,影響比色皿的透光率,。4、操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈,。上海光度計的規(guī)格介紹,。陜西火焰分光光度計教程

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以免影響光效率,。5,、WFZ800-DA、756型等分光光度計,,由于其光電接收裝置為光電倍增管,,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,,而不能用來檢測強(qiáng)光,。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降,。針對其上述特點,,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,,因此在預(yù)熱時,,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn),。6,、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零,。7,、比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,,否則將使測試結(jié)果失去意義,。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,,把儀器置于某一波長處,,石英比色杯;220nm,、700nm裝蒸餾水,,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,,測量其他各池的透射比值,,記錄其示值之差及通光方向,,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響,。典型故障及其排除方法1,、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉,。解決方法:修復(fù)光門部件,,使其完全關(guān)閉,。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕,。c.儀器嚴(yán)重受潮,。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥,。上海元析光度計選購

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