編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進(jìn)行定量時基于朗伯比爾定律,，測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比,。另一方面,，利用熒光分光光度計時,，使用熒光強(qiáng)度,。在低濃度時,，熒光強(qiáng)度與濃度成正比,，所以,，可以用于定量,。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì),。關(guān)于測定結(jié)果,，對兩個機(jī)種的定量、檢測下限值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性度進(jìn)行了比較,，下面將進(jìn)行介紹,。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示,。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,，調(diào)配～5ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光光譜如圖1所示,，根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2和圖3所示,。在圖2中，用～5ug/ml的6點(diǎn)和空白樣品（蒸餾水）創(chuàng)建,，得到了線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線（相關(guān)系數(shù)的平方值是),。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,，噪聲的影響相對較大，導(dǎo)致線性較差,。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強(qiáng)度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強(qiáng)度,。測定條件如表2所示。光度計的廠家哪個好,？上海元析告訴您,。山東紫外可見分光光度計推薦

羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光光譜如圖4所示。短波長側(cè)的熒光被再次吸收,，導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度變高的同時峰頂向長波長側(cè)變化,。根據(jù)577nm的熒光強(qiáng)度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖5以及圖6所示。如圖5所示,，在ug/ml(Abs）或更高的高濃度區(qū)域,標(biāo)準(zhǔn)曲線是彎曲的,，但在圖6的低濃度區(qū)域，可獲得線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。3比較結(jié)果,、定量下限值來比較靈敏度與應(yīng)用報告，使用標(biāo)準(zhǔn)曲線和10次空白測定中計算得的標(biāo)準(zhǔn)偏差σ,，計算出了定量下限值（10σ）和檢測下限值（3σ）,。另外，采用了線性度較高的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和檢測下限值如表3所示,。從通過本實(shí)驗(yàn)算出的定量下限值的比可知，RF-6000的靈敏度較高,，是UV-2600i的400倍以上,。即使對圖3和圖6的低濃度區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，圖6(RF-6000）的結(jié)果中得到了離散較小的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。與對未被樣品吸收的照射光進(jìn)行檢測的吸光光度法不同,，熒光光度法以零為標(biāo)準(zhǔn)檢測熒光，因此噪聲水平低,，可得到較高的靈敏度,。UV-2600i和RF-6000的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)的平方值與濃度范圍的關(guān)系如表4所示。另外,，使用UV-2600i時,，低于空白以外的定量下限值的點(diǎn)除外。即使在未達(dá)到UV-2600i的定量下限值的區(qū)域（0～),。吉林可見分光光度計使用上海光度計批發(fā)多少錢,？

一些儀器具有多種光源供選擇：紫外光、可見光和甚至紅外光（780nm至3,000nm）,。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分（大約380nm到800nm）,。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域,。分光光度計的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度?？梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜,。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量?？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實(shí)驗(yàn)需要,。為了測量吸光值，分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管,。

試劑盒包含一個空白濾光片,、三個檢查光度的濾光片和三個校正波長的濾光片。每個濾光片的吸光值是相對空白濾光片測定的,。這個試劑盒不僅能讓用戶獲得測量準(zhǔn)確性的信息，也能提供精確度的信息,，包括平均值和變異系數(shù),。在測量準(zhǔn)確性和精確度時，將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi),。將測得的輸出吸光度值與允許值范圍比較,。在檢查波長時，測定三個測試濾光片在對應(yīng)波長(260nm,、280nm和800nm)下的吸光度,，以確定每個波長的變異系數(shù)。許多分光光度計,，包括Eppendorf的所有儀器,，都帶有一個特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,，但自動自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定,。自檢主要檢查儀器的幾個部分。它通過測定現(xiàn)有波長的隨機(jī)誤差來校驗(yàn)檢測器,，通過檢查大能量,、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號和光強(qiáng)度來校驗(yàn)光源,。它還通過測定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來確定波長的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差,。遵照這些建議來維護(hù)分光光度計，那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測量結(jié)果有問題啦,。光度計的制作方法難嗎,？上海元析告訴您。

在大部分的樣品類型之中,，分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette,、吸漿管和微孔板。微孔板主要是用來滿足高通量的需要和大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室需求,。但是盡管對于小實(shí)驗(yàn)室來說,，制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實(shí)驗(yàn)時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1 μl-5ml,，并且一些儀器裝備了各種樣品的固定物來滿足各種改變需要,。   適用于分布光度法（發(fā)光強(qiáng)度分布的）和分布光譜法（光譜）對LED光源和照明設(shè)備進(jìn)行測量。光度計的采購行情,，貴不貴,？湖北元析光度計原理

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紫外可見分光光度計是分析測試實(shí)驗(yàn)室里常見的一種分析實(shí)驗(yàn)室儀器,，屬于光學(xué)儀器的一種可廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工,、環(huán)保,、地質(zhì)、機(jī)械,、冶金,、石油、食品,、生物,、材料、計量科學(xué),、農(nóng)業(yè),、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研,、教學(xué)等各個方面,，用來進(jìn)行定性分析、純度檢查,、結(jié)構(gòu)分析,、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等,。世界首臺紫外可見分光光度計誕生于1918年的美國國家標(biāo)準(zhǔn)局,，后來紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現(xiàn)自動記錄,、自動打印,、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,，使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,，其應(yīng)用范圍也在不斷擴(kuò)大,。紫外可見分光光度法從問世以來，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展,，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上,，促使紫外可見分光光度計的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全,，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍,。武漢集思儀器設(shè)備有限公司，一家專注于實(shí)驗(yàn)室儀器服務(wù)的企業(yè),，服務(wù)了上百家實(shí)驗(yàn)室,、科研機(jī)構(gòu)以及各大高校，供多種實(shí)驗(yàn)室儀器和試劑,！有實(shí)驗(yàn)室儀器采購需求的可以咨詢武漢集思儀器設(shè)備有限公司,！山東紫外可見分光光度計推薦

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