分光光度法始于牛頓(Newton)。早在1665年牛頓作了一介罈人的實驗:他讓太陽光透過暗室窗上的小圓孔,,在室內(nèi)形成很細的太陽光束,,該光束經(jīng)棱鏡色散后,在墻壁上呈現(xiàn)紅,、橙,、黃、綠、藍,、靛,、紫的色帶。這色帶就稱為“光譜”,。頓通過這個實驗,;揭示了太陽光是復(fù)合光的事實。紫外可見分光光度計附件發(fā)展紫外可見分光光度計多一種附件就多一種功能,、多一種適應(yīng)性,。縱觀當今世界上的紫外可見分光光度計附件的發(fā)展,,實在是令人眼花繚亂,。這些附件很大程度方便了用戶,是廣大紫外可見分光光度計使用者所歡迎的,,也是紫外可見分光光度計進展的重要內(nèi)容之一,。超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍,。中國澳門可見分光分光光度計教程
5,、WFZ800-DA、756型等分光光度計,,由于其光電接收裝置為光電倍增管,,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,,而不能用來檢測強光,。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降,。針對其上述特點,,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,,因此在預(yù)熱時,,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩(wěn),。6,、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零,。7、比色杯的配套性問題,。比色杯必須配套使用,,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進行每次測試前均應(yīng)進行比較。具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,,把儀器置于某一波長處,,石英比色杯;220nm,、700nm裝蒸餾水,,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,,測量其他各池的透射比值,,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響,。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零,??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,,使其完全關(guān)閉,。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕,。c.儀器嚴重受潮,。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風吹上一會兒使其干燥,。西藏光譜儀分光光度計型號超微量分光光度計的基本原理是基于光與物質(zhì)之間的相互作用,!
PMTs提供快速的反應(yīng)時間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍,。但一些制造商依賴于光敏二極管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量,。在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette,、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求,。但盡管對于小實驗室來說,,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,,并且一些儀器裝備了各種樣品的固定物來滿足各種改變需要,。
編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進行定量時基于朗伯比爾定律,,測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比,。另一方面,,利用熒光分光光度計時,使用熒光強度,。在低濃度時,,熒光強度與濃度成正比,所以,,可以用于定量,。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì),。關(guān)于測定結(jié)果,,對兩個機種的定量、檢測下限值和標準曲線的線性度進行了比較,,下面將進行介紹,。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示,。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,,調(diào)配~5ug/ml的標準溶液。羅丹明B的標準溶液的吸光光譜如圖1所示,,根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標準曲線如圖2和圖3所示,。在圖2中,用~5ug/ml的6點和空白樣品(蒸餾水)創(chuàng)建,,得到了線性度良好的標準曲線(相關(guān)系數(shù)的平方值是),。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,噪聲的影響相對較大,,導致線性較差,。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強度。測定條件如表2所示,。超微量分光光度計氙氣閃光燈為燈源?。?/p>
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差,。但是,當吸收峰寬度較小,,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,,此時波長準確度的影響就必須引起注意。2,、透射比(吸光度)準確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性,。3、雜散光雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的,。雜散光是分析樣品的非吸收光,,隨著樣品濃度的增加,,雜散光的影響也隨之增大,,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差,。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視,。因此,,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。使用與維護1,、若大幅度改變測試波長,,需稍等片刻,等燈熱平衡后,,重新校正“0”和“100%”點,。然后再測量。2,、指針式儀器在未接通電源時,,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,,需進行機械調(diào)零,。3、比色皿使用完畢后,,請立即用蒸餾水沖洗干凈,,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,,影響比色皿的透光率,。4、操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈,。超微量分光光度計不需要預(yù)熱,,可隨時檢測,檢測時間短,;江西元析分光光度計教程
超微量分光光度計一般具有多個光程.中國澳門可見分光分光光度計教程
在前面幾期《聚創(chuàng)環(huán)保小科普》中,,小聚從光度計的原理到紫外可見分光光度計的使用說明,再到適用領(lǐng)域給各位看官介紹的明明白白,,本期小聚給大家重點介紹一下“為什么光度計分為紅外的,?紫外的?原子熒光的,?超微量的,?火焰的?”是不是在選購上很是迷茫呢,?不要著急,,下面重點給大家介紹,。首先:什么是光度計?簡單說,,光度計是將成分復(fù)雜的光,,分解成光譜線的科學檢測儀器。一,、紫外可見分光光度計和紅外分光光度計的原理不同:紫外可見分光光度計的原理:物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上是物質(zhì)中的分子和原子吸收了光中的光波能量,,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果,由于各種物質(zhì)具有不同的分子原子和分子結(jié)構(gòu),,所以在吸收光能量的情況也各不相同,,儀器通過各種物質(zhì)特有的吸光光譜的曲線,來判定被檢測物質(zhì)的含量,,這就是紫外可見分光光度計定性和定量的基礎(chǔ),,紫外可見分光光度計就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分,結(jié)構(gòu),。紅外分光光度計的原理:由光源發(fā)出的光,,被分為能量相同的兩束光線,其中一束通過樣品,,另外一束作為參考光作為參照基準,。這兩束光通過樣品進入紅外分光光度計后,被扇形鏡以一定的頻率調(diào)制,,形成交變信號,,兩束光合為一束。中國澳門可見分光分光光度計教程