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河北光譜儀分光光度計(jì)教程

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-23

并交替通過入射狹縫進(jìn)入單色器中,,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過出射狹縫之后,,被濾光片濾除高級(jí)次光譜,,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào),,經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖,。JC-HW30A雙光束紅外分光光度計(jì)二,、紫外可見分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,,特別是比較大吸收波長λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù),。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,,為藥物分析提供了很好的手段,。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,,被分為能量均等對(duì)稱的兩束,,一束為樣品光通過樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn),。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號(hào),。三,、紫外可見分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜,。若兩者是同一物質(zhì)。紫外分光光度計(jì)的光譜是帶狀光譜,。河北光譜儀分光光度計(jì)教程

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原子熒光光度計(jì)具有原子吸收光譜和原子發(fā)射光譜兩種技術(shù)優(yōu)勢(shì),,并克服現(xiàn)有分析技術(shù)的不足,是一種優(yōu)良的痕量分析儀器,。其原理是利用硼氫化鉀或硼氫化鈉作為還原劑,,將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價(jià)氣態(tài)氫化物,然后借助載氣將其導(dǎo)入原子化器進(jìn)行原子化而形成基態(tài)原子,?;鶓B(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),,激發(fā)態(tài)原子在去活化過程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來,,此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線性關(guān)系,因此通過測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。海南國產(chǎn)分光光度計(jì)推薦分光光度計(jì)從分光元件來講可分為棱鏡式和光柵式兩種,,也有光柵加棱鏡的分光光度計(jì),。

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紫外-可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器,。主要由光源,、單色器、吸收池,、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成,。其工作原理為分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜,。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子,、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,,因此,,每種物質(zhì)就有其特有的,、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ),。本文介紹的是日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用方法。日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用1.開電源,,先開U-3010電源,,再啟動(dòng)電腦2.點(diǎn)擊桌面上UV,啟動(dòng)程序3.點(diǎn)擊method窗口,,將會(huì)出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個(gè)對(duì)話框,,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對(duì)話框;(2)Quantitation對(duì)話框,,如果測(cè)波長選擇wavelength,,數(shù)量可選多個(gè),比如測(cè)定:260nm,,280nm,,230nm,則選擇3個(gè),;如圖所示:(3)Instrument對(duì)話框,,將你要測(cè)定的波長值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,,點(diǎn)確定鍵5.放入空白對(duì)照,。

點(diǎn)擊上方藍(lán)字關(guān)注“公眾號(hào)”分光光度計(jì)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁,,但甚少見到有人維護(hù),。其實(shí),保持分光光度計(jì)清潔,、無污染是成功操作的關(guān)鍵,。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面,。你也可以清潔比色皿本身,。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無絨棉簽來清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部,。如果你必須要用水清潔,,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,,但不是泡在清潔劑中,。如有必要,拆下蓋子,,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無絨棉簽來清潔,。此外,,平時(shí)不使用時(shí),應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,,以免灰塵或其他污染物落入,。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染,那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化,。首先,,利用溫和的清潔劑來清潔設(shè)備。然后,,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面,。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽,。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性,。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長誤差,。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,,因此可采用不同的發(fā)光體作為分光光度計(jì)的光源。

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在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),,將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi),。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長時(shí),,測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(260nm,、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長的變異系數(shù),。許多分光光度計(jì),,包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢,。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定,。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分,。它通過測(cè)定現(xiàn)有波長的隨機(jī)誤差來校驗(yàn)檢測(cè)器,通過檢查大能量,、隨機(jī)誤差,、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來校驗(yàn)光源。分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,。國產(chǎn)分光光度計(jì)型號(hào)

紫外-可見分光光度計(jì)應(yīng)遠(yuǎn)離發(fā)出磁場(chǎng),、電場(chǎng)和高頻電磁波的電氣裝置。河北光譜儀分光光度計(jì)教程

由于儀器的制造和調(diào)整誤差,,單色光的實(shí)際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差,。但是,,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,,此時(shí)波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意,。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,。3,、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,,隨著樣品濃度的增加,,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差,。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,,雜散光的影響更不能忽視。因此,,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo),。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長,,需稍等片刻,,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn),。然后再測(cè)量,。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),,電表的指針必須位于零刻度上,。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零,。3,、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率,。4,、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。河北光譜儀分光光度計(jì)教程

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分光光度計(jì),,又稱光譜儀(spectrometer),,是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器,。測(cè)量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅,、橙,、黃、綠,、藍(lán),、靛、紫組成的連續(xù)色譜,;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源,。