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福建值得信賴的HE染色分析

來源: 發(fā)布時間:2024-03-22

HE染色原理1,、細(xì)胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。2、細(xì)胞漿染色的原理:伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色,。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7—5.0)以下時,,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色,。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,,呈現(xiàn)紅色,。HE染色,,南京英瀚斯,專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司,。福建值得信賴的HE染色分析

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HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋,。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,,確保組織位置規(guī)整,。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,,進(jìn)行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,,厚度在4-8um左右,。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,,充分浸泡10min,,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時候,染液可以充分進(jìn)入組織種,,同時,,二甲苯還可以起到透明的作用,,使切片更容易觀察。江西性價比高的HE染色報告HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化,。

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HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色,。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,,細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,,伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,,厚度4-6微米,厚薄均勻,,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,,紅藍(lán)適度,透明潔凈,,封裱美觀。

HE染色法的話,,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色,?;蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。南京英瀚斯,,專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù)。

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HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,,樣品處理:a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片:蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。浸自來水中沖洗去多余的染色液,約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。此時,,如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理,。HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法,。吉林比較好的HE染色

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HE染色原理:一,、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二,、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時,,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色,。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時,,大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,,而帶負(fù)電荷的陰離子,,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核也被染色,,核和胞漿難以區(qū)分,。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),,就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞、肌肉,、結(jié)締組織,,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比福建值得信賴的HE染色分析