關(guān)于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,，然后甩去封閉用血清，勿洗,；注意：封閉時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整,；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清，切記是BSA,，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了,。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會(huì)非特異性的和蛋白結(jié)合,，從而導(dǎo)致背景過高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合，從這點(diǎn)看,，BSA和血清沒有明顯區(qū)別,。第二是待檢樣本中可能會(huì)有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,，與抗體特異性無關(guān),，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合,。BSA則無法封閉Fc受體,。英瀚斯生物做免疫組化怎么樣？河南靠譜免疫組化注意事項(xiàng)

免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別,。英瀚斯生物為您說明,。除了生物學(xué)來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同,。ICC需要透化,，要么通過固定過程，要么是單獨(dú)的透化步驟,，這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合,。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法,。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,，才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了,。當(dāng)然，就染色而言,，根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的,。湖北大鼠免疫組化是什么英瀚斯實(shí)驗(yàn)外包，病理染色切片免疫組化,，效率高,！

確定cancer分期，免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,，英瀚斯生物為您處理,。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)，與是否浸潤,、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),，而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲,。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,，用于區(qū)分原位*和浸潤*,，一旦上皮性*突破基膜為浸潤，未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白,、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤,。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù),。

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論,。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,，可能會(huì)破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定,，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片,。

（2）冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),，可能會(huì)使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時(shí),，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍,，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可，那就都能做,。

（3）石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩,，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù)，抗原修復(fù)的條件是什么,？ 

（1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,，發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用，從而失去抗原性,。通過抗原修復(fù)，使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,，提高抗原檢測(cè)率,。

（2）修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種，高壓修復(fù),、微波修復(fù),、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種（具體的可以查閱相關(guān)資料,，大量的：中性的,、高pH的等）。

（3）微波修復(fù),，我們一般用6min*4次,，效果不錯(cuò)。

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免疫組化在在病理診斷中,，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn),，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類,、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響,。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性，因此,，深入研究免疫組化原理和技術(shù),，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷,、判斷預(yù)后,、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。

觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,，對(duì)抗原進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,，稱為免疫組織化學(xué)，由于抗原與抗體特異性結(jié)合,，因此通過免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶,、熒光素、同位素,、金屬離子等等)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),。IHC所用標(biāo)本主要為兩大類:組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本，其中制作組織標(biāo)本更常用,、更基本的方法是石蠟切片,。石蠟切片對(duì)于組織形態(tài)保存好，有利于各種染色對(duì)照觀察,，而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標(biāo)本制作方法,。 河南靠譜免疫組化注意事項(xiàng)