HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液,，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條鏈上的磷酸基向外,，帶負(fù)電荷,，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后,，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,，把這個過程稱為染色的分化作用,。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離,，分化不可過度,。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),，而呈藍(lán)色,，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,，稱藍(lán)化作用,，一般多用自來水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán),。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色,。湖南比較好的HE染色

HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證,。2)切片經(jīng)烤片,，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證,。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,，幅度太小,；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶,，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,，在切片染色完成后留下了點狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證,。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證,。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證,。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短,，切片上水分沒有烤干,，也會導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域,。上海比較好的HE染色報告HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片,。

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,，經(jīng)過固定后,，需要先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全,，則切片容易撕開或碎裂，損傷切片刀刀刃,。脫去鈣鹽的過程,，稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,，鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,，以4%甲醛溶液固定后，進(jìn)行脫鈣,。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,，但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,，每日更換新鮮液,，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟,、切片進(jìn)行常規(guī)脫水,、透明、浸蠟,、切片南京英瀚斯,，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺,。

HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,，可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性,。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,，是必須掌握的技術(shù)之一,。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后,，嚴(yán)格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進(jìn)行修剪,、脫水、包埋,、切片,、染色、封片***鏡檢合格的樣片,。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,，在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況，對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血,、出血、水腫,、變性,、壞死、增生,、纖維化,、機化、肉芽組織,、炎性變化等情況文字描述,，并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識,。HE染色取材,、染色以及分析方法介紹。

HE染色注意事項：1．組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,，否則無論進(jìn)行那種染色都會發(fā)生困難,。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時更換以免效率降低,，若室溫過低,，可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。  2．蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,，這可能是液體表面的過氧化物,，必須過濾除去,，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三,、四百張切片后,，著色力會減弱，著色不鮮艷,，呈灰藍(lán)色時應(yīng)及時更換新液。  3．染色的時間長短需依據(jù)：染劑對組織的染色作用,，室溫條件,，切片厚薄，固定液的類別,，染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié),。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。  4．分化十分重要,。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,，若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡，過深等現(xiàn)象,，因此分化后一定要鏡檢,，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色,。否則需再次分化,，不然一旦復(fù)染后，組織會呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象,。  5．還原液不宜過濃,，若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。  6．伊紅宜淡染,，復(fù)染過深胞核會不清晰,，影響鏡檢。 石蠟組織切片的HE染色,。上海比較好的HE染色報告

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HE染色注意事項：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要,。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2,、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵,，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺,，應(yīng)重新染色后再行分色,。3、切片經(jīng)酒精脫水后,，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,，更換酒精,、二甲苯，以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮,、變形,，影響神經(jīng)元形態(tài)。5,、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6,、***封固時,，要用中性樹脂，防止日后褪色,，蓋片要選大于組織塊的面積,，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當(dāng),，樹脂封固時不能有氣泡,。湖南比較好的HE染色