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來源: 發(fā)布時間:2024-07-04

HE染色法,,石蠟切片技術里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,,主要使細胞核內(nèi)的染色質與胞質內(nèi)的核糖體著紫藍色,;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色,。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中稱藍色,所以細胞核被染成藍色,。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質的氨基正電荷的陽離子結合使胞漿染色,,細胞漿,、紅細胞,、肌肉、結締組織,、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍色的細胞核形成鮮明對比。伊紅是細胞漿的良好染料,。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,,可使細胞核著清楚的深藍色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。HE染色是組織學,、病理學教學與科研中比較基礎,、使用比較普遍的技術方法之一。福建比較好的HE染色服務

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HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細胞可以借助普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對組織細胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構造,,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,,細胞核被蘇木素染成藍紫色,細胞質被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細胞結構、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕,;***細胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對比鮮明。病理HE染色哪家好HE染色(脫蠟,、水化,、染色,、脫水、封片) - 實驗方法,。

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HE染色標本一般是針對石蠟標本,,脂滴和石蠟都是的有機物, 都具有非極,,脂滴應該可以溶解石蠟的,。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內(nèi)的核糖體和細胞質染色的方法。 H:Hematoxylin,,蘇木精 E:Eosin,,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色,,被堿染料染色的結構具有嗜堿,。 伊紅(,E)是一種酸染料,,能將細胞質染成紅色或淡紅色,,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,,就可染色,。南京英瀚斯生物

HE染色細胞質過染分析及應對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在,;(2)切片在伊紅染色時間過長;(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快,,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對策:適當稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時間,,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,,停留時間相對均勻。同樣,,也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍黑色沉淀物分析及應對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上,。對策:每天染色前仔細過濾蘇木精染色液,,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。HE染色,,即是蘇木精-伊紅染色法,,是形態(tài)學比較常用的染色方法。

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HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,,樣品處理:a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片:蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調整時間),。浸自來水中沖洗去多余的染色液,約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調整時間),。此時,如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次,。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水,、透明和封片處理。HE染色觀察細胞形態(tài)變化,。福建比較好的HE染色服務

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HE染色:在組織病理學中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,,也有采用焰紅,因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,,還有采用橘黃G,,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色,。伊紅是比較常用的胞質染料,,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結晶,。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應當溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,,可以加速其染色過程,,使得胞質的色澤更加艷麗。結果是細胞核呈藍色,,胞質,、肌肉、結締組織,、紅細胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色,。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。福建比較好的HE染色服務