病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個免疫組化吧”,；不管是臨床醫(yī)師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進(jìn)行細(xì)胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同,、則化學(xué)性質(zhì)不同，通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過,，由于組織固定或儲存等，會造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,，因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用,。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展，根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),，則有了現(xiàn)在免疫組化的方法：不同細(xì)胞,、不同組織中抗原有一定差異，抗體與被測組織中的特定抗原結(jié)合,，進(jìn)而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來,。如有相應(yīng)顯色，則證實可能有被測抗原,；無顯色則可能無被測抗原,。當(dāng)然,，這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”，如抗體的非特異性結(jié)合,、非特異性顯色,，則容易造成“假陽性”；或者雖有相關(guān)抗原,、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等,，則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗的增加,，這些問題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免,，前者如各種顯色方法的優(yōu)化；后者如抗原修復(fù)方法的優(yōu)化,、新型抗體開發(fā)及選擇,。動物、細(xì)胞的免疫組化,、免疫熒光,，就找英瀚斯生物！河北什么是免疫組化可以做什么

免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷,，英瀚斯生物為您介紹,。對于反應(yīng)性增生還是cancer性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別,。在濾泡反應(yīng)性增生時,，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2)，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,，由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá),，bcl-2陽性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),，周期素(Cycling),，核抗原(Ki-67)通過對cancer細(xì)胞增生的程度作出評價，從而提示增生細(xì)胞的良惡性,。黑龍江切片免疫組化價格免疫組化樣本如何處理,？

免疫組化的抗原修復(fù)

很多抗原的可視性可以通過抗原修復(fù)來提高，抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時形成的蛋白質(zhì)交聯(lián),，從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來,。抗原修復(fù)技術(shù)包括不同時間長度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,，例如蛋白酶K,，胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會用到微波爐,，高壓鍋,，蒸箱或水浴,。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù)：檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,，預(yù)熱到95-100°C,。將切片浸沒于染色盤中。蓋子虛掩,，孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時間),。關(guān)掉蒸箱或水浴，將染色盤置于室溫下,，讓切片冷卻20分鐘,。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次，每次2分鐘,。開始封閉步驟,。

免疫組化原理及實驗步驟——實驗外包。眾所周知,，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來,，以其作為抗原或半抗原去免疫實驗動物,，制備特異性抗體，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體,，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,，形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物，將抗原放大,，由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,，因此，還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來,。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分，在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,，從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布,、含量,。英瀚斯生物,，專業(yè)病理老師負(fù)責(zé)免疫組化外包！

免疫組化的局限性,。靈敏度高,、精確性和特異性是一種理想的cancer標(biāo)記物必須具有的，但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標(biāo)記物還沒有能完全滿足這些標(biāo)準(zhǔn),。某些正常細(xì)胞也分泌一些cancer標(biāo)記物,，因此cancer細(xì)胞學(xué)并不是單獨產(chǎn)生一種標(biāo)記物,，即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面,。在免疫組化操作中都必須有適當(dāng)?shù)年栃耘c陰性對照,，作為技術(shù)完整性質(zhì)量控制，如對照組被忽略或不理想時,，免疫組化染色的結(jié)果要謹(jǐn)慎對待,，免疫組化的正確結(jié)果不僅要依靠技術(shù)步驟上規(guī)范化操作，而且有賴于正確的解釋,，在報告免疫組化染色結(jié)果時不應(yīng)孤立地解釋,，應(yīng)考慮到診斷與鑒別診斷、所應(yīng)用的抗體特性,、所研究組織性質(zhì),，同時還要注意假陽性與假陰性結(jié)果的干擾。免疫組化方法步驟是什么,？湖北大鼠免疫組化要多久

免疫組化相關(guān)知識匯總,。河北什么是免疫組化可以做什么

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論,。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性,，如果組織的抗原性較穩(wěn)定,，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的,，可作冰凍切片,。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步,。缺點是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),，可能會使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍,，就不能做石蠟，如寫著兩者都可,，那就都能做,。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩,，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

更多實驗信息,，請點擊英瀚斯官網(wǎng),。 河北什么是免疫組化可以做什么