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免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹:
英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟:
1,、SP三步法
1)石蠟切片,,常規(guī)脫蠟至水。
2)0.3%或3%H2O2去離子水(無(wú)色液體)孵育10-30分鐘,,以滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性,。
3)蒸餾水沖洗,,PBS浸泡5分鐘
4)候選步驟:采用抗原修復(fù):微波(建議30分鐘內(nèi)4次中火)、高壓,、酶修復(fù)方法,。自然冷卻,再用3分鐘×3次.
5)血清封閉:室溫15-30分鐘,,盡可能與二抗來(lái)源一致,。傾去,勿洗,。
6)滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過(guò)夜(比較好復(fù)溫),。PBS沖洗,,3分鐘×5次。
7)滴加生物素標(biāo)記的二抗,,室溫或37℃孵育30分鐘-1h,。
8)PBS沖洗,3分鐘×5次,。
9)滴加SP(鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶),,室溫或37℃孵育30分鐘-1h。
10)PBS沖洗,,3分鐘×5次,。
11)顯色劑顯色(DAB等)。
12)自來(lái)水充分沖洗,。
13)可進(jìn)行復(fù)染,,脫水,透明,。
14)選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?動(dòng)物,、細(xì)胞的免疫組化,、免疫熒光,就找英瀚斯生物,!湖南細(xì)胞免疫組化檢測(cè)
在臨床應(yīng)用中,,免疫組化還可以進(jìn)一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,,在一些組織qi官交界處的cancer,,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類很困難。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),,還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,兩者較難區(qū)別,,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,而角蛋白陽(yáng)性則為胚胎cancer,。新疆大鼠免疫組化哪家好做免疫組化的目的是什么,?
免疫組化分類中,免疫熒光方法,,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹,。一開(kāi)始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析,。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng),、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,,所以在臨床病理診斷,、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。
免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,,英瀚斯生物為您介紹,。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù),?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,,通過(guò)光鏡或電鏡,,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確,、對(duì)比度好,、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光,、電鏡研究等,。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過(guò)氧化物酶-抗過(guò)氧化物酶),、ABC法(卵白素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶),、即用型二步法(聚合物鏈接)等,。英瀚斯實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片免疫組化,,效率高,!
免疫組化(IHC)利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。
英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包,,自有專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室,,可高效完成免疫組化檢測(cè)。
抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察,。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義,。
IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定,、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案,而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑,。 免疫組化相關(guān)知識(shí)匯總。湖南切片免疫組化檢測(cè)
免疫組化怎么做,?步驟方法,?湖南細(xì)胞免疫組化檢測(cè)
免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定,。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,,有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,,這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體,。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求,,可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,我們也有做免疫組化的服務(wù),!湖南細(xì)胞免疫組化檢測(cè)