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青海什么是免疫組化怎么選擇

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-07

免疫組化分類中,,免疫熒光方法,,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù),。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,,在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析,。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高,、快速簡便,,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣,。做免疫組化的目的是什么,?青海什么是免疫組化怎么選擇

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免疫組化實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)總結(jié):

?本實(shí)驗(yàn)室所用切片一般是石蠟切片。

?烘片:使蠟片水分蒸發(fā),,石蠟軟化,,組織切片牢固貼在玻片上;烘片至跟烘片前透明度有差異,。

?抗原修復(fù)時(shí),使片子始終浸沒在修復(fù)液中,,液體不能干,。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,濕盒放置1h,省時(shí)間和結(jié)合效果好,,不要超過1h,,容易過染。

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?二抗使用:兩個(gè)二抗放大信號(hào)或一個(gè)二抗;若抗體信號(hào)強(qiáng),,可不用放大信號(hào),,盡量增大信噪比。

?10XDAB在常溫溶解,,盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配,,放于4度儲(chǔ)存時(shí)間久了效果不佳。

?復(fù)水和脫水時(shí)所用的梯度酒精不可混用,,要區(qū)分開,。

?加抗體和顯色液時(shí),都要將片子甩干,,在半干半濕的狀態(tài)下再加,,不然容易造成溶液的二次稀釋。

?整個(gè)操作過程中在顯色之前,,一定不能干片,。 福建大鼠免疫組化注意事項(xiàng)免疫組化結(jié)果怎么看?

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關(guān)于免疫組化,,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,,以此作為抗原或半抗原,,通過免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì),。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,以其達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,,定位或定量的研究,。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計(jì)免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦!如果您對(duì)此有希望了解更多,,可以與我們聯(lián)系,!

什么是免疫組化?免疫組化的原理是什么,?

1,、定義:用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞原位定性,、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù),。

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2,、原理:根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素,、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),,前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結(jié)合,通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。 有沒有做免疫組化比較好的公司,?

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免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,? 

(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論,。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,,可能會(huì)破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,,則可作石蠟切片,;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片,。

(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,,做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),,可能會(huì)使抗原彌散,;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時(shí),,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,,就不能做石蠟,,如寫著兩者都可,那就都能做,。

(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,,一定要存在-80度的低溫冰箱中,,尤其是用來做原位雜交的的切片,,為了防止RNA降解,,保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,,容易成功,,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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做免疫組化需要多少錢,?青海什么是免疫組化怎么選擇

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,進(jìn)而影響病理診斷,,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),密切配合和共同努力,,病理醫(yī)生選擇抗體,,設(shè)置對(duì)照,判讀結(jié)果,,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個(gè)環(huán)節(jié),,每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結(jié)果,,如抗原保存,蛋白酶消化,,增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理,、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果,。青海什么是免疫組化怎么選擇