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新疆比較好的HE染色分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-27

HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5,;(2)藍(lán)化液殘留過多;(3)切片太??;(4)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,,如果必要的話,,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍(lán)化步驟完成后,,使用的弱堿性溶液被充分洗去,,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度,。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長,,因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩⒁良t的顏色分化掉。HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對方法,。新疆比較好的HE染色分析

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HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,,樣品處理:a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片:蒸餾水2分鐘,。c對于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,,再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液,,約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒,。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí),,如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理,。陜西性價(jià)比高的HE染色冰凍組織切片的HE染色,。

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HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法,。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 ,。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白液體呈粉紅色,。

HE染色知識點(diǎn)1:對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定,。送檢組織需要全部取材的,,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng),、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識點(diǎn)2:組織取材要求在對送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號或標(biāo)記,,以便鏡檢時(shí)核對,。另外,盡可能在取材前對有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,,并編號存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。關(guān)于HE染色,,你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧,。

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HE染色法,,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察,。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋。南京英瀚斯,,專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù),。江蘇HE染色報(bào)告

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HE染色法,,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色,;伊紅為酸性染料,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負(fù)電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞,、肌肉,、結(jié)締組織,、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比,。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料,。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。新疆比較好的HE染色分析