免疫組化(IHC)利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。
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抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察,。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義,。
IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案,,而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑,。 英瀚斯實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片免疫組化,,效率高,!吉林細(xì)胞免疫組化實(shí)驗(yàn)
病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,,還是患者,,他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進(jìn)行細(xì)胞的識(shí)別,。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同,、則化學(xué)性質(zhì)不同,通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色,。不過,,由于組織固定或儲(chǔ)存等,會(huì)造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,,因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用,。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展,根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),,則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細(xì)胞,、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測(cè)組織中的特定抗原結(jié)合,,進(jìn)而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來,。如有相應(yīng)顯色,則證實(shí)可能有被測(cè)抗原,;無顯色則可能無被測(cè)抗原,。當(dāng)然,這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”,,如抗體的非特異性結(jié)合,、非特異性顯色,則容易造成“假陽性”,;或者雖有相關(guān)抗原,、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等,則容易造成“假陰性”,。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的增加,,這些問題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免,,前者如各種顯色方法的優(yōu)化;后者如抗原修復(fù)方法的優(yōu)化,、新型抗體開發(fā)及選擇,。甘肅組織免疫組化外包免疫組化的樣本保存要求是什么?
免疫組化的發(fā)展路程,?在臨床病理診斷中,,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開始,,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,對(duì)于診斷cancer,、cancer分類,、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過程的認(rèn)識(shí),,提高了病理診斷與研究水平,。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性,。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽性反應(yīng)部位,,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實(shí)驗(yàn),,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,。
免疫組化結(jié)果要如何分析?
(1)陽性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法,。在40*光鏡下,,隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽性著色細(xì)胞,,每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,,然后進(jìn)行組間比較即可。
(2)灰密度分析法,??梢酝ㄟ^在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,,然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可,。
(3)評(píng)分法。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色,、淡黃色,、淺褐色,、深褐色)、陽性范圍進(jìn)行評(píng)分(1~4分為0~25%,、26~50%,、51~75%、76~100%),,**終可以分?jǐn)?shù)相加,,再進(jìn)行比較。對(duì)于以上這幾種方法,,各有利弊,,請(qǐng)細(xì)心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質(zhì)量切片,。
英瀚斯生物,專業(yè)病理染色團(tuán)隊(duì),,不止做檢測(cè),,還有專業(yè)病理分析。 免疫組化實(shí)驗(yàn)原理,,操作步驟盡在英瀚斯實(shí)驗(yàn)外包,。
免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明,。除了生物學(xué)來源,,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,,要么通過固定過程,,要么是單獨(dú)的透化步驟,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合,。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,,才能進(jìn)行抗體染色,。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了,。當(dāng)然,就染色而言,,根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的,。做免疫組化的目的是什么?云南動(dòng)物組織免疫組化實(shí)驗(yàn)
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免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域
免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用,。在**學(xué)中,免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),,幫助確定**的類型,、分級(jí)和預(yù)后。例如,,免疫組化通過檢測(cè)ER,、PR和HER2的表達(dá),可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案,。在神經(jīng)科學(xué)中,,免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能。在免疫學(xué)中,,免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平,。此外,免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué),、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域,。 吉林細(xì)胞免疫組化實(shí)驗(yàn)