免疫組化的特點：

1）特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性,，因此,，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分,，LCA顯示淋巴細胞成分,。只有當組織細胞中存在交叉抗原時，才會出現交叉反應,。

2）敏感性高,。在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制,，只有直接法,、間接法等敏感性不高的技術，那時的抗體只能稀釋幾倍,、幾十倍,；現在由于ABC法或SP三步法的出現，使抗體稀釋上千倍,、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合,，這樣高敏感性的抗體抗原反應，使免疫組化方法越來越方便地應用于常規(guī)病理診斷工作,。

3）定位準確,、形態(tài)與功能相結合。該技術通過抗原抗體反應及呈色反應,，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位,，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態(tài)與功能相結合的研究,，對病理學領域開展深入研究是十分有意義的,。

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免疫組化的抗體選擇

抗體是免疫組化實驗成功的關鍵因素之一,。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性,。特異性是指抗體只與目標蛋白結合,，而不與其他蛋白發(fā)生交叉反應,。靈敏度是指抗體能夠檢測低豐度的目標蛋白。適用性是指抗體適用于免疫組化實驗,，而不是其他實驗（如Western blot）,。此外,，免疫組化實驗中還需要考慮抗體的宿主物種,、克隆性和濃度。免疫組化二抗的選擇則需要考慮其與一抗的匹配性,，以及是否帶有顯色或熒光標記,。 江西大鼠免疫組化實驗常見的免疫組化方法有哪些？

免疫組化臨床應用對“未分化”cancer的分類,。未分化cancer包括cancer或肉瘤,，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學類型用非特異性抗體,，在其基礎上再選用特異性抗體做進一步鑒定,。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白，有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,，一些黑色素瘤表現出角蛋白,，這同時也強調了在cancer診斷中應使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求,，可以與我們南京英瀚斯生物進行聯系,，我們也有做免疫組化的服務！

免疫組化應該選擇石蠟切片還是冰凍切片,？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,，可能會破壞組織的抗原性,，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的,，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時不需抗原修復這一步,。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍,，就不能做石蠟，如寫著兩者都可,，那就都能做,。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結構，且容易存放在室溫,，而冰凍切片比較麻煩,，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片,，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好,。

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免疫組化實驗注意事項總結：

?本實驗室所用切片一般是石蠟切片,。

?烘片：使蠟片水分蒸發(fā),，石蠟軟化，組織切片牢固貼在玻片上,；烘片至跟烘片前透明度有差異,。

?抗原修復時，使片子始終浸沒在修復液中,，液體不能干,。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱，濕盒放置1h,，省時間和結合效果好,，不要超過1h，容易過染,。

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?二抗使用：兩個二抗放大信號或一個二抗,；若抗體信號強,，可不用放大信號，盡量增大信噪比,。

?10XDAB在常溫溶解,，盡可能現用現配,，放于4度儲存時間久了效果不佳。

?復水和脫水時所用的梯度酒精不可混用,，要區(qū)分開,。

?加抗體和顯色液時，都要將片子甩干,，在半干半濕的狀態(tài)下再加,，不然容易造成溶液的二次稀釋。

?整個操作過程中在顯色之前,，一定不能干片,。 免疫組化常見問題原因分析！山西免疫組化外包

免疫組化技術的原理,、分類和優(yōu)點！新疆大鼠免疫組化外包

免疫組化在臨床應用中,，還能及時準確的發(fā)現微小轉移灶,。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務，一站式醫(yī)學科研平臺,。采用常規(guī)病理方法難以檢出的實體瘤轉移稱為微小轉移灶,。在常規(guī)組織切片中，辨別單個或幾個轉移性cancer細胞很難,，淋巴結內竇性組織細胞增生與某些cancer的早期轉移有時也不易區(qū)別,，而采用免疫組化方法，有助于及時準確的發(fā)現微小(cancer)轉移灶,。對乳腺cancer而言主要是腋窩淋巴結的檢測,，淋巴結微轉移患者預后差，這對進一步醫(yī)療和預后判斷十分有意義,。新疆大鼠免疫組化外包