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來源: 發(fā)布時間:2025-04-09

關(guān)于免疫組化的封閉:用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,,然后甩去封閉用血清,,勿洗;注意:封閉時間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整,;封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,,切記是BSA,不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了,。①使用血清好還是BSA好,?答:***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結(jié)合,從而導(dǎo)致背景過高,,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合,,從這點(diǎn)看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別,。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體,,可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,與抗體特異性無關(guān),,封閉血清中有抗體,,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無法封閉Fc受體,。免疫組化失敗的原因,?江西小鼠免疫組化推薦

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細(xì)胞屬性的判定,免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用,。通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,,來判定細(xì)胞的屬性,,確定cancer的來源。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記,,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽性;血管源性cancer中內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽性等等,。如果您需要做實(shí)驗(yàn)外包,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,。湖北病理免疫組化要多久免疫組化技術(shù)的原理,、分類和優(yōu)點(diǎn)!

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關(guān)于免疫組化,,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,,以此作為抗原或半抗原,,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì),。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,,定位或定量的研究,。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦!如果您對此有希望了解更多,,可以與我們聯(lián)系!

免疫組化在在病理診斷中,,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn),,免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類,、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響,。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,因此,,深入研究免疫組化原理和技術(shù),,并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷,、判斷預(yù)后,、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。

觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,,對抗原進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué),,由于抗原與抗體特異性結(jié)合,,因此通過免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶,、熒光素、同位素,、金屬離子等等)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),。IHC所用標(biāo)本主要為兩大類:組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本,其中制作組織標(biāo)本更常用,、更基本的方法是石蠟切片,。石蠟切片對于組織形態(tài)保存好,有利于各種染色對照觀察,,而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標(biāo)本制作方法,。 英瀚斯生物為您詳解免疫組化實(shí)驗(yàn)指南,!

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免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟

免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟通常包括組織固定、切片,、抗原修復(fù),、封閉、一抗孵育,、二抗孵育,、顯色和復(fù)染等。首先,,組織樣本需要經(jīng)過固定(如福爾馬林固定)以保持其形態(tài)結(jié)構(gòu),。然后,將固定后的組織包埋在石蠟中并切成薄片,??乖迯?fù)是為了暴露被固定過程掩蓋的抗原表位,常用的方法有熱修復(fù)和酶消化,。封閉步驟是為了減少非特異性結(jié)合,,通常使用血清或BSA。一抗孵育是關(guān)鍵步驟,,一抗與目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合,。二抗孵育則是通過二抗與一抗結(jié)合,并連接顯色系統(tǒng),。,,通過顯色和復(fù)染使目標(biāo)蛋白可視化。 南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎,?湖北病理免疫組化要多久

免疫組化結(jié)果怎么看,?江西小鼠免疫組化推薦

免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹,。對于反應(yīng)性增生還是cancer性增生,,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別,。在濾泡反應(yīng)性增生時,濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2),,bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,,由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá),bcl-2陽性,。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA),,周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過對cancer細(xì)胞增生的程度作出評價,,從而提示增生細(xì)胞的良惡性,。江西小鼠免疫組化推薦