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福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-04-10

病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”,;不管是臨床醫(yī)師,,還是患者,他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的識(shí)別,。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同、則化學(xué)性質(zhì)不同,,通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色,。不過,由于組織固定或儲(chǔ)存等,,會(huì)造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,,因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展,,根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),,則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細(xì)胞、不同組織中抗原有一定差異,,抗體與被測(cè)組織中的特定抗原結(jié)合,,進(jìn)而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來(lái)。如有相應(yīng)顯色,,則證實(shí)可能有被測(cè)抗原,;無(wú)顯色則可能無(wú)被測(cè)抗原。當(dāng)然,,這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”,,如抗體的非特異性結(jié)合、非特異性顯色,,則容易造成“假陽(yáng)性”,;或者雖有相關(guān)抗原、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等,,則容易造成“假陰性”,。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)的增加,這些問題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免,,前者如各種顯色方法的優(yōu)化,;后者如抗原修復(fù)方法的優(yōu)化、新型抗體開發(fā)及選擇,。免疫組化protocol,,詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng)。福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)

福建什么是免疫組化注意事項(xiàng),免疫組化

免疫組化的結(jié)果分析:

免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,、陰性對(duì)照(或替代對(duì)照)(陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問題,;陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色)。一般情況下,,陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為:Ag定位,,包漿,、胞核、胞膜,、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性,。且染色的強(qiáng)度不同(顏色深淺不一);陰性對(duì)照的特點(diǎn)為:染色細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別,,顏色具有彌散性,,分布均勻。

英瀚斯生物可承接各類病理染色,,包括免疫組化,。

說明:免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析,但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,,要求背景染色淺且特異性染色較深,,這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確。 河南切片免疫組化檢測(cè)臨床樣本檢測(cè),,免疫組化,,英瀚斯生物專業(yè)病理。

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免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別,。英瀚斯生物為您說明,。除了生物學(xué)來(lái)源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同,。ICC需要透化,,要么通過固定過程,要么是單獨(dú)的透化步驟,,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合,。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法,。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,,才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了,。當(dāng)然,就染色而言,,根據(jù)所使用的抗體來(lái)優(yōu)化還是少不了的,。

免疫組化分類中,免疫熒光方法,,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹,。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,,從而可確定組織中某種抗原的定位,,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng),、靈敏度高,、快速簡(jiǎn)便,所以在臨床病理診斷,、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。動(dòng)物,、細(xì)胞的免疫組化,、免疫熒光,就找英瀚斯生物,!

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免疫組化的局限性,,可能會(huì)有假陽(yáng)性。陽(yáng)性信號(hào)定位不正確即為假陽(yáng)性,,包括著色不勻,、背景著色、邊緣效應(yīng),,另外組織的某些特定成分也能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,。假陽(yáng)性可能的原因有:(1)一抗?jié)舛燃耙豢故欠袷В贵w有一個(gè)合適的濃度范圍且必須在有效期內(nèi)使用,,過期的抗體或者不著色,,或者背景著色,形成假陽(yáng)性;(2)試劑未充分覆蓋組織,,組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng),,由于室溫的影響夏季孵育時(shí)間稍短,冬季孵育時(shí)間稍長(zhǎng);(4)操作過程中組織變干,,造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影,,產(chǎn)生假陽(yáng)性;(5)3,3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色時(shí)間太長(zhǎng),,DAB宜現(xiàn)配現(xiàn)用,,配制時(shí)間比較好在30min以內(nèi);(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質(zhì),因此間質(zhì)和胞漿中出現(xiàn)很多非特異性的染色,,如內(nèi)源性酶血紅蛋白,、肌紅蛋白等造成的著色,可以通過血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見于壞死組織中,,使壞死組織呈較高的背景染色,,在免疫組化中應(yīng)避免選擇壞死組織較多的蠟塊。常見的免疫組化方法有哪些,?青??孔V免疫組化哪家好

免疫組化方法步驟是什么?福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)

免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來(lái)檢測(cè)組織切片中的抗原(如蛋白),。immuno的詞根來(lái)自操作中所使用的抗體,,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,,簡(jiǎn)稱ICC),。這兩個(gè)詞大家經(jīng)常混著用,,看著好像差不多,,但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。IHCvsICC對(duì)于IHC,,組織是來(lái)自患者或動(dòng)物,,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,,封片后再處理,。通過這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,,同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu),。對(duì)于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,,只剩下整個(gè)細(xì)胞來(lái)染色,。ICC的來(lái)源可以是細(xì)胞懸液,來(lái)自患者或動(dòng)物(如血涂片,、拭子等),,或在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。 福建什么是免疫組化注意事項(xiàng)