免疫組化實驗所用的抗體

免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備,。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清,，是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物,。

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免疫組化常用的染色方法

根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標(biāo)法,，親和組織化學(xué)法,，后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,，其中生物素—抗生物素染色法常用,。 英瀚斯生物，專業(yè)病理老師負(fù)責(zé)免疫組化外包,！云南做得好的免疫組化怎么選擇

細(xì)胞爬片免疫組化檢測實驗步驟

1,、選擇貼壁良好的細(xì)胞爬片，用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干,。

2,、PBS洗3次，每次5min,。3,、切片放入3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10min,，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,。

4、PBS洗3次,，每次5min,，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）。

5,、去除BSA液,，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織，4℃過夜,。

6,、PBS洗3次，每次5min,。

英瀚斯生物,，細(xì)胞、動物,、臨床樣本免疫組化檢測都可完成,！

7、去除PBS液,，每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗,，4℃孵育50min。

8,、PBS洗3次,，每次5min。

9,、去除PBS液,，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,，顯微鏡控制顯色。

10,、顯色完全后，蒸餾水或自來水沖洗,，蘇木素復(fù)染,，1%鹽酸酒精分化（1s），自來水沖洗,，氨水返藍(lán),，流水沖洗。

11,、切片經(jīng)過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度,，脫水干燥，二甲苯透明,，中性樹膠封固,。 甘肅做得好的免疫組化要多久做免疫組化意味什么？

免疫組化臨床應(yīng)用中,，可以對傳染性疾病診斷,。應(yīng)用抗病毒、細(xì)菌,、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進(jìn)行免疫組化染色,，可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物，如乙型肝炎病毒(HBV),、巨細(xì)胞病毒(CMV),、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV),、丙型肝炎病毒(HVC),、細(xì)小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV),、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,，由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風(fēng)險性,、高敏感性,、特異性、有效性等特點,，可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態(tài)學(xué)診斷,，使嚴(yán)重傳染性疾病得以早期醫(yī)療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養(yǎng)方法的情況下，提供診斷并對發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究和認(rèn)識,。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務(wù),，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺,。

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對其染色結(jié)果的判斷，進(jìn)而影響病理診斷,，所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,，它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào)，密切配合和共同努力,，病理醫(yī)生選擇抗體,，設(shè)置對照，判讀結(jié)果,，指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實驗操作,，保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環(huán)節(jié),，每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結(jié)果,，如抗原保存，蛋白酶消化,，增強技術(shù)及對抗體的管理,、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果,。英瀚斯生物,，可做免疫組化定量分析。

醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化,。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2,、c-myc、P53蛋白等,，卵巢上皮性cancer中P53的過表達(dá)與cancer的擴(kuò)散,、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,，PTEN基因表達(dá)減弱,，提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,，如表皮生長因子受體(EGFR),、Ki-67、PCNA,、cycling等可對cancer細(xì)胞的增生做出評價,，表達(dá)指數(shù)越高，表明其增殖指數(shù)越活躍,，惡性度增高,，預(yù)后不良，其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67,、EGFR陽性者,，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,，并與ji素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER),、孕ji素受體(PR)等,，應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer，如對乳腺cancer中ER,、PR的檢測,，有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療，并能判斷預(yù)后,，ER及PR陽性表達(dá)、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達(dá)病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,，而ERPR,、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化結(jié)果怎么看,？福建細(xì)胞免疫組化怎么選擇

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免疫組化實驗所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的？

實驗所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片,，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用,、**基本的方法，對于組織形態(tài)保存好,，且能作連續(xù)切片,，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔,，供回顧性研究,；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù),，是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法,。

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