免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用,？

定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢,。相比于其他蛋白檢測方法,，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,，是定位檢測分析優(yōu)先方法,，尤其對于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性,；確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位,；對某類**進行進一步的病理分型；軟組織**診斷,；為臨床提供治療方案的選擇,；近年來，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),，使許多疑難**得到了明確診斷,。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時，準(zhǔn)確率可達50%-75%,。

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免疫組化的抗原修復(fù)

很多抗原的可視性可以通過抗原修復(fù)來提高,，抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時形成的蛋白質(zhì)交聯(lián)，從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來,?？乖迯?fù)技術(shù)包括不同時間長度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化，例如蛋白酶K,，胰蛋白酶或胃蛋白酶,。加熱的方法通常會用到微波爐，高壓鍋,，蒸箱或水浴,。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù)：檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,，預(yù)熱到95-100°C,。將切片浸沒于染色盤中。蓋子虛掩,，孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時間),。關(guān)掉蒸箱或水浴，將染色盤置于室溫下,，讓切片冷卻20分鐘,。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次，每次2分鐘,。開始封閉步驟,。 福建大鼠免疫組化實驗有沒有推薦的免疫組化外包公司？

免疫組化的特點：

1）特異性強,。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,，因此，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示,，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分,，LCA顯示淋巴細胞成分。只有當(dāng)組織細胞中存在交叉抗原時,，才會出現(xiàn)交叉反應(yīng),。

2）敏感性高。在應(yīng)用免疫組化的起始階段,，由于技術(shù)上的限制,，只有直接法,、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時的抗體只能稀釋幾倍,、幾十倍,；現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍,、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結(jié)合,，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)，使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作,。

3）定位準(zhǔn)確,、形態(tài)與功能相結(jié)合。該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，可在組織和細胞中進行抗原的準(zhǔn)確定位,，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,，對病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的,。

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免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論,。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性,，如果組織的抗原性較穩(wěn)定,，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的,，可作冰凍切片,。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步,。缺點是細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu),，可能會使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可,，那就都能做,。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，且容易存放在室溫,，而冰凍切片比較麻煩,，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片,，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好,。

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免疫組化的結(jié)果分析：

免疫組化實驗通常需要設(shè)置陽性對照,、陰性對照（或替代對照）（陽性對照是排除方法和實驗系統(tǒng)有無問題；陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色）,。一般情況下,，陽性對照顏色的特點為：Ag定位，包漿,、胞核,、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性,。且染色的強度不同（顏色深淺不一）,；陰性對照的特點為：染色細胞與組織無區(qū)別，顏色具有彌散性,，分布均勻,。

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說明：免疫組化實驗可以對結(jié)果進行定量分析,，但要實驗得到的必須是高質(zhì)量的染色切片，要求背景染色淺且特異性染色較深,，這樣分析的結(jié)果才會比較準(zhǔn)確,。 做免疫組化意味什么？湖北小鼠免疫組化要多久

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免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,，有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，這同時也強調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體,。如果您有實驗外包的需求,，可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù),！河北免疫組化價格