HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng)：多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸,，使溶液pH降低，從而影響染色,。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過24小時(shí),。多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中,，固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響,，須盡量洗去殘留的多聚甲醛,。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),，有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析,。新疆專業(yè)的HE染色多少錢

HE染色分化作用：染色后,，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過程稱為分化作用,，所用的溶液稱為分化液,。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),，使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,，必須用0.5%鹽酸乙醇分化,，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去，在進(jìn)行伊紅染色,，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明,。因此，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步,。返藍(lán)作用：分化之后,，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色,，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),，呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后,，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用,。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),，但所需時(shí)間較長。寧夏專業(yè)的HE染色分析比較常見的病理染色HE染色,？

HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色,，蛋白性液體呈粉紅色,。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,，細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),，伊紅著色由淺變深。

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長,，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致,。對策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理,。將切片水洗數(shù)分鐘,，然后重新脫水、透明,、封固,。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤，盡量不要讓其干燥,。細(xì)胞核呈紅,、棕色改變原因：蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對策：首先,，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,，發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時(shí)更換,。其次，可用流水,、溫水或弱堿性溶液如稀氨水,、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后,，給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間,。HE染色，即是蘇木精-伊紅染色法,，是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法,。

HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在,；（2）切片在伊紅染色時(shí)間過長；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過的太快,，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時(shí)間,，或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),，停留時(shí)間相對均勻。同樣,，也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上,。對策：每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生,。HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng),。四川值得信賴的HE染色服務(wù)

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HE染色不管怎么操作,，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補(bǔ)救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定,，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,；對于已經(jīng)制出的片子,，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上，然后自來水漂洗5min,，可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,，補(bǔ)充染色媒介，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,，單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。新疆專業(yè)的HE染色多少錢