醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc,、P53蛋白等,,卵巢上皮性cancer中P53的過(guò)表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良,。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR),、Ki-67,、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)價(jià),,表達(dá)指數(shù)越高,,表明其增殖指數(shù)越活躍,惡性度增高,,預(yù)后不良,,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對(duì)乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽(yáng)性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,,并與ji素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,,應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,,如對(duì)乳腺cancer中ER、PR的檢測(cè),,有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預(yù)后,,ER及PR陽(yáng)性表達(dá),、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達(dá)病例對(duì)三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,而ERPR,、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大,。免疫組化流程是什么樣的?山東動(dòng)物組織免疫組化怎么選擇
免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來(lái)檢測(cè)組織切片中的抗原(如蛋白),。immuno的詞根來(lái)自操作中所使用的抗體,,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,,簡(jiǎn)稱ICC),。這兩個(gè)詞大家經(jīng)常混著用,,看著好像差不多,,但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。IHCvsICC對(duì)于IHC,,組織是來(lái)自患者或動(dòng)物,,經(jīng)過(guò)冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,,封片后再處理,。通過(guò)這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,,同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu),。對(duì)于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,,只剩下整個(gè)細(xì)胞來(lái)染色,。ICC的來(lái)源可以是細(xì)胞懸液,來(lái)自患者或動(dòng)物(如血涂片,、拭子等),,或在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。 青海切片免疫組化外包免疫組化protocol,詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng),。
免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,?
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論,。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,,可能會(huì)破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,,則可作石蠟切片,;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片,。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,,做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),,可能會(huì)使抗原彌散,;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時(shí),,目錄上都寫(xiě)著做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著只能做冰凍,,就不能做石蠟,,如寫(xiě)著兩者都可,那就都能做,。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,,一定要存在-80度的低溫冰箱中,,尤其是用來(lái)做原位雜交的的切片,為了防止RNA降解,,保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,,容易成功,,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
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免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么,?
(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過(guò)程中,,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,,從而失去抗原性。通過(guò)抗原修復(fù),,使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,,提高抗原檢測(cè)率。
(2)修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種,,高壓修復(fù),、微波修復(fù)、胰酶修復(fù),。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,,大量的:中性的、高pH的等),。
(3)微波修復(fù),,我們一般用6min*4次,效果不錯(cuò),。
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免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定,。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,,有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,,這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體,。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,,我們也有做免疫組化的服務(wù),!免疫組化結(jié)果怎么看?青海細(xì)胞免疫組化注意事項(xiàng)
英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包,,多種病理染色熟練掌握,,可做免疫組化!山東動(dòng)物組織免疫組化怎么選擇
免疫組化的發(fā)展路程,?在臨床病理診斷中,,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開(kāi)始,,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,,對(duì)于診斷cancer,、cancer分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,,同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過(guò)程的認(rèn)識(shí),,提高了病理診斷與研究水平。但是,,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術(shù),,必須熟悉各種抗體真陽(yáng)性反應(yīng)部位,,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用,。如果您有免疫組化相關(guān)的實(shí)驗(yàn),,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。山東動(dòng)物組織免疫組化怎么選擇
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