免疫組化的特點(diǎn)：

1）特異性強(qiáng),。免疫學(xué)的基本原理決定抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，因此,，免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細(xì)胞成分,。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時(shí)，才會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng),。

2）敏感性高,。在應(yīng)用免疫組化的起始階段，由于技術(shù)上的限制,，只有直接法,、間接法等敏感性不高的技術(shù)，那時(shí)的抗體只能稀釋幾倍,、幾十倍,；現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn)，使抗體稀釋上千倍,、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,，這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng)，使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作,。

3）定位準(zhǔn)確,、形態(tài)與功能相結(jié)合。該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,，因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察，這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,，對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義的,。

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免疫組化臨床應(yīng)用中,，可以對(duì)傳染性疾病診斷,。應(yīng)用抗病毒,、細(xì)菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進(jìn)行免疫組化染色,，可以檢測(cè)和診斷許多傳染性疾病病原微生物,，如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細(xì)胞病毒(CMV),、人乳T狀瘤病毒(HPV),、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC),、細(xì)小病毒B19,、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,，由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時(shí)性,、低風(fēng)險(xiǎn)性、高敏感性,、特異性,、有效性等特點(diǎn)，可以用于(1)用于人類新病原微生物的識(shí)別;(2)提供快速的形態(tài)學(xué)診斷,，使嚴(yán)重傳染性疾病得以早期醫(yī)療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養(yǎng)方法的情況下,，提供診斷并對(duì)發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究和認(rèn)識(shí)。英瀚斯生物專業(yè)做實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺(tái),。河南免疫組化要多少錢英瀚斯生物，專業(yè)病理老師負(fù)責(zé)免疫組化外包,！

免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹：

英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟：

1,、SP三步法

1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水,。

2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘,，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。

3）蒸餾水沖洗,，PBS浸泡5分鐘

4）候選步驟：采用抗原修復(fù)：微波（建議30分鐘內(nèi)4次中火）,、高壓、酶修復(fù)方法,。自然冷卻,，再用3分鐘×3次.

5）血清封閉：室溫15-30分鐘，盡可能與二抗來源一致,。傾去,，勿洗。

6）滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過夜（比較好復(fù)溫）,。PBS沖洗,，3分鐘×5次。

7）滴加生物素標(biāo)記的二抗,，室溫或37℃孵育30分鐘-1h,。

8）PBS沖洗，3分鐘×5次,。

9）滴加SP（鏈霉親和素-過氧化物酶）,，室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

10）PBS沖洗,，3分鐘×5次,。

11）顯色劑顯色（DAB等）。

12）自來水充分沖洗,。

13）可進(jìn)行復(fù)染,，脫水，透明,。

14）選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?

免疫組化在在病理診斷中,，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷,、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響,。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù),，并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作,，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預(yù)后,、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用,。

觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況，對(duì)抗原進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,，稱為免疫組織化學(xué)，由于抗原與抗體特異性結(jié)合,，因此通過免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶,、熒光素、同位素,、金屬離子等等)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),。IHC所用標(biāo)本主要為兩大類:組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本，其中制作組織標(biāo)本更常用、更基本的方法是石蠟切片,。石蠟切片對(duì)于組織形態(tài)保存好,，有利于各種染色對(duì)照觀察，而且能長(zhǎng)期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,，但可進(jìn)行抗原修復(fù),，是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標(biāo)本制作方法。 免疫組化protocol,，詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng),。

免疫組化實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)總結(jié)：

?本實(shí)驗(yàn)室所用切片一般是石蠟切片。

?烘片：使蠟片水分蒸發(fā),，石蠟軟化,，組織切片牢固貼在玻片上；烘片至跟烘片前透明度有差異,。

?抗原修復(fù)時(shí),，使片子始終浸沒在修復(fù)液中，液體不能干,。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,，濕盒放置1h，省時(shí)間和結(jié)合效果好,，不要超過1h,，容易過染。

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?二抗使用：兩個(gè)二抗放大信號(hào)或一個(gè)二抗；若抗體信號(hào)強(qiáng),，可不用放大信號(hào),，盡量增大信噪比。

?10XDAB在常溫溶解,，盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配,，放于4度儲(chǔ)存時(shí)間久了效果不佳。

?復(fù)水和脫水時(shí)所用的梯度酒精不可混用,，要區(qū)分開,。

?加抗體和顯色液時(shí)，都要將片子甩干,，在半干半濕的狀態(tài)下再加,，不然容易造成溶液的二次稀釋。

?整個(gè)操作過程中在顯色之前,，一定不能干片,。 常見的免疫組化方法有哪些,？河南免疫組化要多少錢

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免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包,。眾所周知，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,。免疫組化正是利用這一特性,，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,，制備特異性抗體,，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,，形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物,，將抗原放大，由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,，因此,，還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,，在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布,、含量,。湖南大鼠免疫組化價(jià)格