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吉林值得信賴的HE染色

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-02

HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。 分化:蘇木素染色之后,,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,,把這個(gè)過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使色素與組織解離,,分化不可過度。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),,而呈藍(lán)色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,,稱藍(lán)化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍(lán),,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán),。HE染色取材、染色以及分析方法介紹,。吉林值得信賴的HE染色

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HE染色法,,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,再在高倍鏡下觀察,。從人或動(dòng)物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋。吉林值得信賴的HE染色HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。

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HE染色等常規(guī)染色,,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,,并且對抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,,不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,,膽固醇染色,。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定),。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片,。

HE染色注意事項(xiàng):1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要,。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長,,組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,,要在自來水中沖洗時(shí)間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,,這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳,,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2、切片染蘇木精后,,分色這一步是關(guān)鍵,,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳,。如果過分延長分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺,,應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后,,入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),,此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,,更換酒精,、二甲苯,以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮,、變形,,影響神經(jīng)元形態(tài)。5,、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6,、***封固時(shí),,要用中性樹脂,防止日后褪色,,蓋片要選大于組織塊的面積,,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),,樹脂封固時(shí)不能有氣泡,。專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺,南京英瀚斯生物,。

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HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過高,、過熱,在石蠟停留的時(shí)間過長,;(2)固定時(shí)間太短,,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,,組織不能在熱的蠟液中停留過長時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,,完成浸蠟處理后的組織,,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,,以備包埋,。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可,。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始,。HE染色,,一站式實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺。內(nèi)蒙古靠譜的HE染色

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HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,,是**基本的病理學(xué)染色技術(shù)。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),,如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色,。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。質(zhì)量好的HE具備條件1.細(xì)胞核與細(xì)胞漿藍(lán)紅相映,鮮艷亮麗,;2.胞核鮮明,、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見,;3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及假物質(zhì)成分均能顯示出來,。吉林值得信賴的HE染色