HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,,灰染答:(1)組織未及時(shí)固定,,部分自溶;或固定不佳,,深部組織未處理到,。這種只能重新固定了,。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,,因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,,染色效果不好。(3)包埋時(shí)蠟的溫度過高,,或切片后烤片時(shí)間和溫度過久過高都不好,,可能會(huì)導(dǎo)致無法染色。(4)脫蠟不徹底,;染料有問題,;分化過度導(dǎo)致的顏色變淡,鏡下組織界限不清,;染完后的脫水和透明不佳,,水霧殘留在組織上。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),,戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧),。HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析,。甘肅HE染色多少錢
HE染色法,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合使胞漿染色,,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞,、肌肉,、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對(duì)比,。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),,如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色,。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。甘肅HE染色多少錢腎臟組織HE染色如何觀察,。
HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,,經(jīng)過固定后,,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全,,則切片容易撕開或碎裂,,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,,稱為脫鈣,。骨組織固定24小時(shí)后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,,以4%甲醛溶液固定后,,進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間,,但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水,、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水,、透明,、浸蠟、切片南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。
HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時(shí)組織太厚,,固定過久,導(dǎo)致深部組織固定不佳,,而表淺組織過度固定,,而透明、脫水,、浸蠟均是如此,,這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開固定,。(2)制片過程有問題,,切片厚薄不一,或者有刀痕,,或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時(shí),,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,,脫蠟時(shí)間過短或脫蠟液使用過久,導(dǎo)致脫蠟不徹底,。(4)染色液過少,,著色不均勻,;或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn),這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一,。(5)分化不當(dāng),。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) ,。
HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,,藉由電荷與吸附性的差異,,組織結(jié)構(gòu)對(duì)不同染料的結(jié)合程度不同,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核,,Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),,染色優(yōu)良的片子可以幫助我們?cè)陲@微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,,而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一,,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng),。甘肅HE染色多少錢
HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng),。甘肅HE染色多少錢
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡(jiǎn)稱HE染色法 ,,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸性染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué),、胚胎學(xué),、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法,。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),,如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色,。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。甘肅HE染色多少錢