免疫組化的局限性,，可能會(huì)有假陽(yáng)性。陽(yáng)性信號(hào)定位不正確即為假陽(yáng)性,，包括著色不勻,、背景著色、邊緣效應(yīng),，另外組織的某些特定成分也能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,。假陽(yáng)性可能的原因有:(1)一抗?jié)舛燃耙豢故欠袷В贵w有一個(gè)合適的濃度范圍且必須在有效期內(nèi)使用,，過(guò)期的抗體或者不著色，或者背景著色,，形成假陽(yáng)性;(2)試劑未充分覆蓋組織,，組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，由于室溫的影響夏季孵育時(shí)間稍短，冬季孵育時(shí)間稍長(zhǎng);(4)操作過(guò)程中組織變干,，造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影,，產(chǎn)生假陽(yáng)性;(5)3，3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色時(shí)間太長(zhǎng),，DAB宜現(xiàn)配現(xiàn)用,，配制時(shí)間比較好在30min以內(nèi);(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質(zhì)，因此間質(zhì)和胞漿中出現(xiàn)很多非特異性的染色,，如內(nèi)源性酶血紅蛋白,、肌紅蛋白等造成的著色，可以通過(guò)血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見于壞死組織中,，使壞死組織呈較高的背景染色，在免疫組化中應(yīng)避免選擇壞死組織較多的蠟塊,。英瀚斯生物免疫組化,，高效高質(zhì)量出結(jié)果。河北做得好的免疫組化多少錢

免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),，抗原修復(fù)的條件是什么,？ 

（1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過(guò)程中，發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,，從而失去抗原性,。通過(guò)抗原修復(fù)，使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,，提高抗原檢測(cè)率,。

（2）修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種，高壓修復(fù),、微波修復(fù),、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種（具體的可以查閱相關(guān)資料,，大量的：中性的,、高pH的等）。

（3）微波修復(fù),，我們一般用6min*4次,，效果不錯(cuò)。

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免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包,。眾所周知，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,。免疫組化正是利用這一特性,，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)，以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,，制備特異性抗體,，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過(guò)氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,，形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物,，將抗原放大，由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無(wú)色的,，因此，還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來(lái),。通過(guò)抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分，在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,，從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布、含量,。

免疫組化結(jié)果中的假陰性是指所有抗體標(biāo)記的切片均呈陰性,，無(wú)陽(yáng)性信號(hào)，假陰性結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng),。導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因有:(1)抗原修復(fù)方法選擇不當(dāng),，根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)采用不同的修復(fù)方法,，大多數(shù)抗體要求熱修復(fù)，熱修復(fù)又包括高壓修復(fù),、微波修復(fù)及煮沸熱修復(fù);而對(duì)某些細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞間質(zhì)抗原需要用酶消化,，如表皮生長(zhǎng)因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化，而Vimentin則不用修復(fù);(2)一抗本身的問題:一抗效價(jià)降低或失效,。在免疫組化中染色結(jié)果的假陰性會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)診或漏診,，進(jìn)而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問題的可通過(guò)設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照,，比較兩者染色結(jié)果,。若陽(yáng)性對(duì)照有表達(dá)，表明試劑和染色體系及實(shí)驗(yàn)步驟均無(wú)問題;若陽(yáng)性對(duì)照無(wú)表達(dá),，則檢測(cè)過(guò)程中某一試劑或某個(gè)步驟存在問題，應(yīng)逐一查找原因,。英瀚斯生物，專業(yè)承接免疫組化等各類病理染色檢測(cè),！

免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類,。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,，有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原,，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體,。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求,，可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù),！有沒有推薦的免疫組化外包公司,？浙江什么是免疫組化推薦

免疫組化如何得到好的效果？河北做得好的免疫組化多少錢

確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,，臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作,。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源,，進(jìn)一步確定原發(fā)部位,。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer,、胰腺cancer中陽(yáng)性,，而在肺cancer、乳腺cancer,、腎cancer中陰性;Tg陽(yáng)性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽(yáng)性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽(yáng)性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin),、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin),、肌紅蛋白(Myoglobin)陽(yáng)性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽(yáng)性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù),。河北做得好的免疫組化多少錢

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