關(guān)于免疫組化,，抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,，免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,，以此作為抗原或半抗原,，通過免疫動物后獲得特異性的抗體,，再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,，因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,，以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究,。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦,！如果您對此有希望了解更多，可以與我們聯(lián)系,！關(guān)于免疫組化,，你想知道的都在這里！福建做得好的免疫組化要多久

實(shí)驗(yàn)失敗常見問題分析有哪些：

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性,？

答：這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致,，可能的原因有：1.染色操作不當(dāng)，致使染色失??；2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性；3.緩沖液中有疊氮化鈉,，抑制了酶的活性,；4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)取＝ㄗh逐一排查,，找到原因后重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性，這是為什么,？答：與上一個問題類似,，出現(xiàn)的原因也是試驗(yàn)操作存在問題，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃,，或者干片了,；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時間過長；3.抗體溫育的時間過長等。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,，這是為什么,？答：以下幾方面會導(dǎo)致切片的背景過深：1.蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血，造成抗體的非特異性反應(yīng),；2.內(nèi)源性過氧化酶沒有完全阻斷,，顯色過程中過氧化酶與酶底物反應(yīng)，造成背景,；3.底物呈色反應(yīng)時間過長或呈色反應(yīng)后漂洗不徹底,。 青海大鼠免疫組化價格英瀚斯生物免疫組化，高效高質(zhì)量出結(jié)果,。

免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包,。眾所周知，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,。免疫組化正是利用這一特性,，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動物,，制備特異性抗體,，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,，形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物,，將抗原放大，由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,，因此,，還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),，顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,，在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布,、含量,。

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的？

實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片,，后者包括組織印片,、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法,，對于組織形態(tài)保存好,，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對照觀察,；還能長期存檔,，供回顧性研究,；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù),，是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法,。

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免疫組化結(jié)果要如何分析,？

 （1）陽性著色細(xì)胞計數(shù)法,。在40*光鏡下，隨機(jī)選擇不重疊的10個視野,，機(jī)器或人工計數(shù)陽性著色細(xì)胞,，每組3~6張不同動物組織切片，然后進(jìn)行組間比較即可,。

（2）灰密度分析法,。可以通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域,、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,，然后進(jìn)行統(tǒng)計分析即可。

（3）評分法,。用光學(xué)顯微鏡下對組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色,、淡黃色、淺褐色,、深褐色）,、陽性范圍進(jìn)行評分（1~4分為0~25%、26~50%,、51~75%,、76~100%），**終可以分?jǐn)?shù)相加,，再進(jìn)行比較,。對于以上這幾種方法，各有利弊,，請細(xì)心選擇,。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片,。

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免疫組化有哪幾種分類 ？

 1）按標(biāo)記物質(zhì)的種類,，如熒光染料,、放射性同位素、酶（主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）,、鐵蛋白,、膠體金等，可分為免疫熒光法,、放射免疫法,、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。

 2）按染色步驟可分為直接法（又稱一步法）和間接法（二步,、三步或多步法）,。與直接法相比，間接法的靈敏度提高了許多,。

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3）按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,，如過氧化物酶-抗過氧化物酶（***）法,；親和連接，如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）法,、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)（SP）法等,，其中SP法是比較常用的方法；聚合物鏈接,，如即用型二步法,，此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測。 福建做得好的免疫組化要多久

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