HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。 分化:蘇木素染色之后,,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,,把這個(gè)過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使色素與組織解離,,分化不可過度。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),,而呈藍(lán)色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,,稱藍(lán)化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍(lán),,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán),。HE染色,南京英瀚斯,,專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司,。江蘇HE染色公司
HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片,。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,,并且對抗原基本無影響。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,,ATP染色,膽固醇染色,。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定),。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。江蘇HE染色價(jià)格HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟,。
HE染色不管怎么操作,,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救:防患于未然,,要么使用新鮮的中性甲醛固定,,要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,;對于已經(jīng)制出的片子,,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上,然后自來水漂洗5min,,可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補(bǔ)充染色媒介,,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷,。一,、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu),。例如,,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),,細(xì)胞核著藍(lán)黑色,,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等,。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),,因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,,必須不斷地總結(jié),,方能提高,。常用HE染色試劑配制方法。
HE染色分化作用:染色后,,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,,這個(gè)過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液,。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而褪色,。經(jīng)蘇木精染色后,,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,,在進(jìn)行伊紅染色,,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步,。返藍(lán)作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,呈紅色,,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),,但所需時(shí)間較長,。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。重慶比較好的HE染色分析
HE染色中固定液如何配置,。江蘇HE染色公司
HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,,它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中,,染色液的酸堿度為pH6左右,,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,,這些物質(zhì)稱為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,,pH值升高時(shí),,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性,;pH值降低時(shí),原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng),。江蘇HE染色公司
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