外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類(lèi)型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,,這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫(kù)ExoCarta的資料,,目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān),。外泌體通過(guò)生物體液被多種不同類(lèi)型的細(xì)胞分泌,包括滑膜液,,母乳,,血液,尿液,,唾液,,羊水和血液中的血清,這表明它們?cè)诩?xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過(guò)程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡(jiǎn)而言之,它們是天然膜囊泡,,將蛋白質(zhì),,RNA,DNA和脂質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞攜帶到另一個(gè)細(xì)胞,,調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能,。外泌體研究使用血漿樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)較好。外泌體之家
外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶家族的一種,。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1,、2、4,、5,、6,、7、11等),。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)),、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源),、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素(不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞),。外泌體的提取的方式:超速離心法。尿液外泌體提取試劑盒方法外泌體在免疫調(diào)控,、肉瘤轉(zhuǎn)移和血管生成以及生物標(biāo)志物等領(lǐng)域發(fā)揮著非常重要的作用,。
密度梯度離心法根據(jù)在蔗糖、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層,,目前普遍應(yīng)用的是蔗糖,,這種方法可以成功地將亞細(xì)胞成分(例如過(guò)氧化物酶體,線(xiàn)粒體和核內(nèi)體)分離到密度梯度溶液中的不同層中,。樣品被放置在梯度的頂部,,當(dāng)施加離心力時(shí),,樣品中的顆粒以獨(dú)特的速率通過(guò)梯度,,該梯度以從上到下的密度增加。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,,隨后可以通過(guò)分餾收集,,密度梯度超速離心對(duì)從蛋白質(zhì)聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效。此方法獲得的外泌體純度較高,,但步驟繁瑣,、費(fèi)時(shí)且會(huì)造成外泌體損失。
外泌體的提取,、純化和鑒定:每一個(gè)外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱,。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體,并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體,。另外利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果,。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過(guò)形態(tài)學(xué)、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實(shí)現(xiàn)的,。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,,如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,能比較好的保護(hù)其包被的物質(zhì),,且能靶向特定細(xì)胞或組織,因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng),。外泌體的直徑比微泡的要小,,后者直徑為100nm-1μm。
外泌體遞送藥物的優(yōu)勢(shì):許多新的候選藥物(例如蛋白質(zhì)和核酸)在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定,,對(duì)診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn),。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問(wèn)題,外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子,。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物,,通過(guò)外泌體遞送藥物可以避免巨噬細(xì)胞的吞噬作用或降解,還可以在體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間循環(huán),,保持效果,。其中,外泌體能夠穿過(guò)血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì),。外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。乳液外泌體提取試劑盒報(bào)價(jià)
外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,,活躍細(xì)胞內(nèi)通路。外泌體之家
外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,,但是純度不足,,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),,也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí),,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法,,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,,耗時(shí),,量少。外泌體之家
上海宇玫博生物科技有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中,,一直處在一個(gè)不斷銳意進(jìn)取,,不斷制造創(chuàng)新的市場(chǎng)高度,,多年以來(lái)致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價(jià)值理念的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的商業(yè)口碑,,成績(jī)讓我們喜悅,,但不會(huì)讓我們止步,殘酷的市場(chǎng)磨煉了我們堅(jiān)強(qiáng)不屈的意志,,和諧溫馨的工作環(huán)境,,富有營(yíng)養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開(kāi)拓創(chuàng)新,勇于進(jìn)取的無(wú)限潛力,,上海宇玫博生物科技供應(yīng)攜手大家一起走向共同輝煌的未來(lái),,回首過(guò)去,我們不會(huì)因?yàn)槿〉昧艘稽c(diǎn)點(diǎn)成績(jī)而沾沾自喜,,相反的是面對(duì)競(jìng)爭(zhēng)越來(lái)越激烈的市場(chǎng)氛圍,,我們更要明確自己的不足,做好迎接新挑戰(zhàn)的準(zhǔn)備,,要不畏困難,,激流勇進(jìn),以一個(gè)更嶄新的精神面貌迎接大家,,共同走向輝煌回來(lái),!