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廣州血清外泌體

來源: 發(fā)布時間:2023-03-02

眾所周知外泌體是供體細(xì)胞分泌出來的胞外囊泡,,被受體細(xì)胞吸收后起到調(diào)控受體細(xì)胞功能,,這篇綜述文章主要討論了外泌體的生成、生化性質(zhì)以及作為藥物遞送載體的潛力,。外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,,如免疫中抗原呈遞、肉瘤的生長與遷移,、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不同的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,能比較好的保護其包被的物質(zhì),且能靶向特定細(xì)胞或組織,,因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng),。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。廣州血清外泌體

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胞外囊泡和外泌體的異質(zhì)性。細(xì)胞外囊泡的兩大類是胞外體和外泌體,。胞外體通過質(zhì)膜出芽釋放,,大小在50~1mm之間。外泌體起源于內(nèi)泌體途徑,,通過形成包含ILVs的ESEs,、LSEs,較終形成多泡體,。當(dāng)MVBs與質(zhì)膜融合時,,外泌體釋放(尺寸范圍~40~160nm)。外泌體是一個高度異質(zhì)性的群體,,具有獨特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力,。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物),、對受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來概念化,。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。體液外泌體提取試劑盒價錢外泌體內(nèi)容物的進入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合,。

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外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料,,目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān),。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌,包括滑膜液,,母乳,,血液,尿液,,唾液,,羊水和血液中的血清,這表明它們在細(xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡而言之,它們是天然膜囊泡,,將蛋白質(zhì),,RNA,DNA和脂質(zhì)從一個細(xì)胞攜帶到另一個細(xì)胞,,從而調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能,。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定。液體和細(xì)胞外成分,,如蛋白質(zhì),、脂類、代謝物,、小分子和離子,,可以通過內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷,與細(xì)胞表面蛋白一起進入細(xì)胞,。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向,。這一出芽過程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合,。ESEs也可以與ER和TGN融合,,這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達它們的。因此,,一些ESEs可以包含膜和腔的成分,,可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白,、免疫調(diào)節(jié)蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白,、RNA,、DNA、氨基酸和代謝物,。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預(yù)處理和制備要求較高,外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響,。

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外泌體分離的主要挑戰(zhàn)之一是消除納米級污染物,,包括干擾外泌體標(biāo)志物解析的游離核酸和脂蛋白。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。盡管如此,,它仍難以符合臨床應(yīng)用所需的標(biāo)準(zhǔn),主要是由于該方法得到的外泌體純度不足,,產(chǎn)量較低,,完整性欠佳且分離純化操作耗時長。其他方法,,例如基于聚乙二醇(PEG)的沉淀,,磷脂酰絲氨酸親和捕獲,尺寸排阻色譜法和膜親和捕獲,,近年來已經(jīng)出現(xiàn)在特定的應(yīng)用中,,但是只適用于特定場景。近來,,非對稱流場-流分離方法已被用于從細(xì)胞和瘤子培養(yǎng)基中高分辨率地分選EV亞群,,但其通量受到繁瑣的樣品制備程序的影響。單一分析耗時的過程也限制了其普遍的應(yīng)用,。因此,,目前亟需開發(fā)創(chuàng)新技術(shù)以提高外泌體分離純化的效率,純度,,產(chǎn)量,,速度和耐用性?;诔瑸V的技術(shù)提供了潛在的有前途的替代方法,,但它們也有缺點。在切向流過濾中,,使進料流平行于多孔膜流動,,以避免堵塞。然而,,盡管已實現(xiàn)使用切向流過濾從大量條件細(xì)胞培養(yǎng)基中濃縮外泌體,,但受制于其一次性模塊的成本高,高剪切應(yīng)力,,難以處理小體積樣品等因素而難以應(yīng)用于臨床分析,。外泌體的提取的方式:PS親和法。細(xì)菌提取試劑盒分類

外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm),由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌,。廣州血清外泌體

外泌體的相關(guān)成分:1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣,是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN,、GTPases。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide、SM,、PC,,限制膜流動,參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能。6,、外泌體中含有核酸,,包括miRNA、DNA,、lncRNA,、mRNA;同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中,。7、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子:Ral,、ARF6,、PLD2、RAB家族,。8,、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的:如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列(GGAG/CCCU),,進行主動包埋。外泌體的膜同細(xì)胞一樣,,是磷脂雙分子層,。廣州血清外泌體

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