外泌體的臨床應(yīng)用：間充質(zhì)干細胞是目前較普遍使用的細胞類型,，它具有自我更新,，多向分化,、分泌細胞因子和細胞外囊泡體,、免疫調(diào)節(jié),、來源普遍等特點,，在臨床診療中取得了良好的成果,。間充質(zhì)干細胞來源外泌體與間充質(zhì)干細胞有著相似的功能,，包括修復與再生組織,、阻止炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)機體免疫，但外泌體相對于間充質(zhì)干細胞又有許多優(yōu)勢,。首先,，間充質(zhì)干細胞來源外泌體更穩(wěn)定，更好保存,，易于管理和控制,，可以人為改變其內(nèi)容物的種類和數(shù)量。其次,，它們沒有活細胞,，不會像間充質(zhì)干細胞那樣可能會過多增殖而放大療效或者病變導致疾病加重；另外,，它有可能避免某些針對間充質(zhì)干細胞的調(diào)控問題,，間充質(zhì)干細胞來源外泌體有代替間充質(zhì)干細胞的趨勢。干細胞外泌體攝取流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升,。外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體,。上清液提取試劑盒產(chǎn)品標準

細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,，由多種細胞分泌,，內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì),、細胞因子或遺傳物質(zhì)。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子,，而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子,。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域,、醫(yī)學基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。細胞上清外泌體熒光標記通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預測腫細胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標,。

NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度更快,。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀，用激光光束穿過樣本,，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時會發(fā)生散射,，通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光，捕捉外泌體的布朗運動,，實現(xiàn)顆?？梢暬Ｈ缓笫褂肧tokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度,，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),，另外,，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)干擾,。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成，其大小均一,，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質(zhì)干細胞,、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標記物,、調(diào)控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。外泌體發(fā)揮功能方式：細胞-細胞之間的通訊,，譬如抗原遞呈，這是發(fā)揮功能的主要方式,。

外泌體是包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm),，由所有體外和體內(nèi)細胞持續(xù)分泌。由于人體內(nèi)復雜的功能,，包括細胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導,，外泌體正在改變研究。這些細胞外囊泡正在生長,，這既是為了了解其生物學功能,，也是為了將其用于實際應(yīng)用，如無創(chuàng)診斷和高級調(diào)理開發(fā),。Dynabeads提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具,，用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量，以及體外和體內(nèi)追蹤,，以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體,。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的。您可使用靈活且可擴展的總外泌體分離試劑從細胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體,。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇,，包括處理少量樣本和處理多個樣本,。外泌體中含有核酸，包括miRNA,、DNA,、lncRNA、mRNA,。遼寧干細胞外泌體

外泌體的提取的方式：超速離心法,。上清液提取試劑盒產(chǎn)品標準

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復制或增強抗病毒免疫來阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機制來促進病毒的傳播,。外泌體可以作為一個假包膜，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強病毒進入受體細胞,，并幫助逃避抗病毒免疫,。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運也可能增強傳染性。外泌體介導的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細胞病毒,；HSV-1,1型皰疹病毒),。上清液提取試劑盒產(chǎn)品標準

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