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腦脊液提取試劑盒原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-03

Exosome,,中文名外泌體,,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。2015年,,隨著精確醫(yī)學(xué)概念的提出,,越來越多的人開始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療,。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,,已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,,在精確醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景。在免疫系統(tǒng)中,,據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制,。腦脊液提取試劑盒原理

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外泌體生物學(xué)功能:1、在心血管系統(tǒng)中,,據(jù)報(bào)道,,源自人胚胎干細(xì)胞(ESC)的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷;2,、在免疫系統(tǒng)中,,據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制;3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中,,外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動(dòng),從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理,;迄今為止,,尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑。然而,,比較明顯,,其結(jié)合過程從外泌體識(shí)別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始。膜受體的識(shí)別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),,它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號(hào)通路的活躍,,外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中,。北京外泌體Dil外泌體實(shí)際應(yīng)用之前,,需要使用大型動(dòng)物模型進(jìn)行進(jìn)一步研究和臨床試驗(yàn)。

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外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡,,其大小為30-150nm,,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等),,參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,,包括血液,、唾液、尿液、乳汁等,,同時(shí)也存在于組織樣本中,,如腦組織、肌肉組織,、脂肪組織等,。所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性,,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng),。同時(shí),,外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用;此外,,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送,。

外泌體研究背景:胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,主要由微囊泡,、凋亡小體、外泌體組成,。而外泌體是其中一類小囊泡,,直徑為30~150nm,密度1.10~1.18g/ml,,可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,存在于血液,、唾液,、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實(shí),,外泌體可以通過細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等特定物質(zhì),,發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、肉瘤細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析。外泌體的提取分離方法:PEG-base沉淀法,。

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外泌體提取在短時(shí)間(一周之內(nèi))使用,,可以放在4度保存,如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進(jìn)行分裝,,分別放在-20度或-80度。外泌體檢測(cè)方法:外泌體分離之后,,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,多角度進(jìn)行鑒定,。l,、透射電鏡鑒定法:簡(jiǎn)稱TEM,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,,即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。2、納米顆粒追蹤分析法:簡(jiǎn)稱NTA,,該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度快,檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。外泌體的大?。和饷隗w的直徑約30-150nm。腦脊液外泌體示蹤

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),。腦脊液提取試劑盒原理

外泌體的生物發(fā)生和鑒定,。液體和細(xì)胞外成分,如蛋白質(zhì),、脂類,、代謝物、小分子和離子,,可以通過內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷,,與細(xì)胞表面蛋白一起進(jìn)入細(xì)胞。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向,。這一出芽過程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合。ESEs也可以與ER和TGN融合,,這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達(dá)它們的,。因此,一些ESEs可以包含膜和腔的成分,,可以表示不同的起源,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。腦脊液提取試劑盒原理

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