外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2,、4,、5、6,、7,、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）,、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）,、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細(xì)胞）,。外泌體的提取的方式：超速離心法,。外泌體分離之后,，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。杭州腦脊液外泌體

外泌體的基本信息：1,、外泌體的大?。和饷隗w的直徑約40-150nm。2,、從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。3、外泌體屬于胞外囊泡類,，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。4、外泌體的直接比微泡的要小,，后者直徑為100nm-1μm,。5、外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個(gè),，近乎于平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè),。6、外泌體的細(xì)胞源：人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,。7,、外泌體具有異質(zhì)性，即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別,。8,、外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙,、體液中,。9、外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體,。研究所提取試劑盒分類外泌體的提取的方式：超速離心法,。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一,，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。

尺寸排阻色譜法（SEC）根據(jù)大小來分離樣本。該技術(shù)應(yīng)用了一個(gè)裝有多孔聚合物珠的色譜柱,，該聚合物珠包含多個(gè)孔和通道,，分子根據(jù)其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時(shí)間,，而大分子則較早地從柱子上洗脫下來,。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相比,，SEC分離的外泌體不受剪切力的影響,，剪切力可能會(huì)改變囊泡的結(jié)構(gòu)。此方法分離到的外泌體純度較高,，在電鏡下大小均一,，但是獲取量少，所需設(shè)備特殊,。此外,，SEC方法與超濾相結(jié)合已被用于尿液來源的外泌體的分離和分析。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運(yùn)至其他PD-L1表達(dá)低或沒有PD-L1的細(xì)胞,，并可能與PD-1結(jié)合,。

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升,。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記，可用流式細(xì)胞儀檢測到陽性表達(dá),，從而實(shí)現(xiàn)對外泌體的定量,。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測時(shí)需要單顆粒懸浮液，當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時(shí)將導(dǎo)致一次觀察到多個(gè)顆粒,，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。因此，為了通過流式細(xì)胞儀觀察,，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價(jià)結(jié)合固定在磁珠表面上,，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中。在流式細(xì)胞術(shù)之前,，可在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡,。當(dāng)樣品通過流式細(xì)胞儀時(shí)采集熒光信號，不只可以對外泌體進(jìn)行高通量分析，還可以基于抗原表達(dá)對外泌體進(jìn)行定量或分類,。外泌體的提取分離方法：PEG-base沉淀法,。腹水外泌體circRNA測序

干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法。杭州腦脊液外泌體

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料,，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān),。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌，包括滑膜液,，母乳,，血液，尿液,，唾液,，羊水和血液中的血清，這表明它們在細(xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡而言之，它們是天然膜囊泡,，將蛋白質(zhì),，RNA，DNA和脂質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞攜帶到另一個(gè)細(xì)胞,，調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能,。杭州腦脊液外泌體

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