外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1,、2,、4,、5、6,、7,、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）,、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細胞來源）,、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細胞）,。外泌體的提取的方式：超速離心法,。磁珠免疫法分離的外泌體，生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實驗,，難以普遍普及。外泌體顏色

細胞外小泡通過充當脂肪組織,、肝臟,、骨骼肌和免疫細胞之間的細胞間通訊方式，在肥胖及其代謝并發(fā)癥的發(fā)展中發(fā)揮作用,。外泌體可能在外周胰島素敏感性的調(diào)節(jié)中起作用,，外周胰島素敏感性是T2D發(fā)病機理的主要組成部分。外泌體似乎通過至少兩種不同的機制來調(diào)節(jié)胰島素敏感性,，即通過調(diào)節(jié)炎癥或通過與胰島素反應性部位的直接相互作用,。后者可通過與主要胰島素信號分子（例如磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt信號通路）相互作用而影響胰島素信號通路而直接或間接發(fā)生。與對照組相比,，糖尿病患者的血漿EV含量更高,，并且與對照組相比，糖尿病小鼠的血漿外泌體數(shù)量也更高。然而,，確定外泌體的作用及其在肝/腸軸通訊中的潛在作用將需要對它們的組成有更好的了解,，特別是飲食是否會改變腸源性外泌體的含量，因此就胰島素反應而言它們的生物學功能尚未研究,。黑龍江外泌體NTA采用磁珠法時,，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響。

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過將無水聚合物,，如聚乙二醇（PEG）,，與樣品混合來沉淀外泌體。PEG聚合物競爭性結(jié)合水分子,，增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體,，然后通過離心分離外泌體。這種分離的方法快速,，簡便,，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設定。然而,，這種方法缺乏選擇性,，PEG聚合物不只會導致外泌體小泡沉淀，還會引起其他細胞外囊泡,、細胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀,。因此，在使用這種方法之前,，必須進行樣品預處理,，例如過濾或超速離心，以減少較終的外泌體制劑的污染,。

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,，主要由微囊泡、凋亡小體,、外泌體組成,。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液,、唾液、尿液等多種體液中,。越來越多的研究證實,，外泌體可以通過細胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等特定物質(zhì),，發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、肉瘤細胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用,。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析,。利用外泌體自身的物理化學性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果,。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心，這種操作簡單,、省時,，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜,，耗時,，量少。流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升,。江蘇干細胞外泌體

外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。外泌體顏色

外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等，同時也存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。所有的細胞都能分泌外泌體,，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,，調(diào)控細胞生理活動。同時,，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。外泌體顏色

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