外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力,。這使它們成為理想的診療傳遞分子,。外泌體由于其天然的材料運(yùn)輸特性，固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體,，其適合于遞送各種化學(xué)物質(zhì),，蛋白質(zhì),，核酸和基因診療劑。（1）外泌體作為小分子的藥物傳遞載體：關(guān)于外泌體遞送姜黃素,，多巴胺,，PTX和DOX等化學(xué)診療藥物的報(bào)道已有充分文獻(xiàn)記載。（2）外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),，例如酶,，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)。（3）外泌體作為核酸的藥物遞送載體：研究表明,，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA,，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾,。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進(jìn)行研究的主要策略,。外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA,。組織外泌體miRNA芯片

常規(guī)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)（RT-PCR）普遍用于microRNA的檢測(cè)實(shí)踐中,，但外泌體樣品中的microRNA豐度極低,，普通RT-PCR技術(shù)的靈敏度已經(jīng)不能夠滿足。第三代微滴式數(shù)字PCR——ddPCR技術(shù),，成為外泌體microRNA檢測(cè)的選擇技術(shù),。微滴式數(shù)字PCR（DropletdigitalPCR）,，又成為“油包水PCR”，在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對(duì)樣品進(jìn)行微滴化處理,，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個(gè)納升級(jí)的微滴,，其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子,。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,，逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè)，有熒光信號(hào)的微滴判讀為1,，沒有熒光信號(hào)的微滴判讀為0,，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。植物外泌體miRNA芯片外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1、免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高,、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn),。2、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。3,、色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一,，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能,、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)病）方面的潛力,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定。液體和細(xì)胞外成分,，如蛋白質(zhì),、脂類、代謝物,、小分子和離子,，可以通過內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷，與細(xì)胞表面蛋白一起進(jìn)入細(xì)胞,。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向,。這一出芽過程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合,。ESEs也可以與ER和TGN融合,，這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達(dá)它們的。因此,，一些ESEs可以包含膜和腔的成分,，可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白,、免疫調(diào)節(jié)蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白,、RNA、DNA,、氨基酸和代謝物,。外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體,。血液外泌體lncRNA芯片

利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果。組織外泌體miRNA芯片

外泌體分離的主要挑戰(zhàn)之一是消除納米級(jí)污染物,，包括干擾外泌體標(biāo)志物解析的游離核酸和脂蛋白,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù)。盡管如此,，它仍難以符合臨床應(yīng)用所需的標(biāo)準(zhǔn),，主要是由于該方法得到的外泌體純度不足，產(chǎn)量較低,，完整性欠佳且分離純化操作耗時(shí)長,。其他方法，例如基于聚乙二醇（PEG）的沉淀,，磷脂酰絲氨酸親和捕獲,，尺寸排阻色譜法和膜親和捕獲，近年來已經(jīng)出現(xiàn)在特定的應(yīng)用中,，但是只適用于特定場(chǎng)景,。近來，非對(duì)稱流場(chǎng)-流分離方法已被用于從細(xì)胞和瘤子培養(yǎng)基中高分辨率地分選EV亞群,，但其通量受到繁瑣的樣品制備程序的影響,。單一分析耗時(shí)的過程也限制了其普遍的應(yīng)用。因此,，目前亟需開發(fā)創(chuàng)新技術(shù)以提高外泌體分離純化的效率，純度,，產(chǎn)量,，速度和耐用性?；诔瑸V的技術(shù)提供了潛在的有前途的替代方法,，但它們也有缺點(diǎn)。在切向流過濾中,，使進(jìn)料流平行于多孔膜流動(dòng),，以避免堵塞。然而,，盡管已實(shí)現(xiàn)使用切向流過濾從大量條件細(xì)胞培養(yǎng)基中濃縮外泌體,，但受制于其一次性模塊的成本高，高剪切應(yīng)力,，難以處理小體積樣品等因素而難以應(yīng)用于臨床分析,。組織外泌體miRNA芯片

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