細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,,由多種細(xì)胞分泌,,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì),、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì),。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子,。近年來,,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應(yīng)用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域,、寄生蟲領(lǐng)域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等,。采用磁珠法時,外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。中草藥外泌體
外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)(如細(xì)胞因子,、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),,在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,,與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,使得它具有潛在的應(yīng)用價值,,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),,另一方面也可以作為診療手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究,,應(yīng)選用血漿還是血清?答:血清是血液凝固之后收集的液體,,所以其中少了纖維蛋白原,凝血因子,,以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,具有凝血功能,。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合,。天津天九細(xì)胞外泌體外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。
外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡,,其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),,含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等),參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,,如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,,但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,,調(diào)控細(xì)胞生理活動。同時,,外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送,。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多,,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),,也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心,這種操作簡單,、省時,,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,,耗時,,量少。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),,它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,。外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體。
Exosome,,中文名外泌體,,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對細(xì)胞分泌膜泡的興趣。2015年,,隨著精確醫(yī)學(xué)概念的提出,,越來越多的人開始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個新型的研究熱點(diǎn),,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,,已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,在精確醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。外泌體作為一個新型的研究熱點(diǎn),,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性。外泌體的沉淀
外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,,活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。中草藥外泌體
外泌體是分泌的細(xì)胞外囊泡的主要群體,,是具有生物活性的脂雙層囊泡,,大小約為30-100nm,,由不同類型的正常細(xì)胞和瘤子細(xì)胞自然產(chǎn)生和釋放。這些囊泡在細(xì)胞間通訊中起重要作用,,并影響細(xì)胞外環(huán)境和免疫系統(tǒng)反應(yīng),。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細(xì)胞外空間,并將各種生物活性分子(貨物)轉(zhuǎn)運(yùn)至靶細(xì)胞,。外泌體貨物的組成非常多樣化,,包括各種免疫阻止和免疫刺激蛋白、趨化因子,、細(xì)胞因子,、細(xì)胞受體、脂質(zhì)以及不同的核酸,,如miRNA和環(huán)狀RNA,。外泌體可以通過多種方法給藥,靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑,。中草藥外泌體
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