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外泌體的相關(guān)成分:1,、外泌體的膜同細胞一樣,是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC,,限制膜流動,參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導,、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能。6,、外泌體中含有核酸,,包括miRNA、DNA,、lncRNA,、mRNA;同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中,。7、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子:Ral,、ARF6,、PLD2、RAB家族,。8,、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的:如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列(GGAG/CCCU),進行主動包埋,。外泌體的膜同細胞一樣,,是磷脂雙分子層。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,,包括血液,、唾液、尿液,、乳汁等,。血漿外泌體
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA):將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,,由于抗體-抗原相互作用,,表達抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,,并使用另一種抗體檢測固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體,,當使用標準液(已知外泌體的量)創(chuàng)建標準曲線時,,甚至可以進行定量。但是,,此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進行預(yù)處理,。同樣,,流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度。江西海洋生物外泌體外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合,,從而活躍細胞內(nèi)的信號通路。
外泌體的來源與特征:外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,,通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,,其大小均一,直徑為40-100nm,,密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細胞、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,可作為疾病診斷標記物,、調(diào)控靶細胞功能,、參與細胞生物學活動等。例如:含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,;骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體顯示出了在診療各種疾病(如心肌病和神經(jīng)?。┓矫娴臐摿?。
外泌體病毒傳染:外泌體可以限制或促進病毒傳染。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復制或增強抗病毒免疫來阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機制來促進病毒的傳播,。外泌體可以作為一個假包膜,通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強病毒進入受體細胞,,并幫助逃避抗病毒免疫,。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運也可能增強傳染性。外泌體介導的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細胞病毒,;HSV-1,1型皰疹病毒),。1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),。
Exosome,,中文名外泌體,是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡,,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物,。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白,、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣,。2015年,,隨著精確醫(yī)學概念的提出,越來越多的人開始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療,。外泌體作為一個新型的研究熱點,,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,,在精確醫(yī)學發(fā)展上有著光明的前景,。外泌體的提取的方式:超速離心法。電子顯微鏡下外泌體大小不一,,通常呈茶托樣的圓形或橢圓形,。血清提取試劑盒價格
外泌體其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。血漿外泌體
細胞外小泡通過充當脂肪組織,、肝臟,、骨骼肌和免疫細胞之間的細胞間通訊方式,在肥胖及其代謝并發(fā)癥的發(fā)展中發(fā)揮作用,。外泌體可能在外周胰島素敏感性的調(diào)節(jié)中起作用,,外周胰島素敏感性是T2D發(fā)病機理的主要組成部分。外泌體似乎通過至少兩種不同的機制來調(diào)節(jié)胰島素敏感性,,即通過調(diào)節(jié)炎癥或通過與胰島素反應(yīng)性部位的直接相互作用,。后者可通過與主要胰島素信號分子(例如磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信號通路)相互作用而影響胰島素信號通路而直接或間接發(fā)生。與對照組相比,,糖尿病患者的血漿EV含量更高,,并且與對照組相比,糖尿病小鼠的血漿外泌體數(shù)量也更高,。然而,,確定外泌體的作用及其在肝/腸軸通訊中的潛在作用將需要對它們的組成有更好的了解,特別是飲食是否會改變腸源性外泌體的含量,,因此就胰島素反應(yīng)而言它們的生物學功能尚未研究,。血漿外泌體
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