磁珠免疫法分離外泌體：將針對目的抗原的抗體通過生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面,，然后將磁珠與樣品共孵育，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物,，再用蒸餾水或者PBS沖洗，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體,。該方法相對于ELISA的好處主要是，珠粒提供了更大的表面積來捕獲外泌體,，從而提高了分離效率。此外,，使用磁珠時(shí)，樣品起始體積沒有上限,，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL，且ELISA洗脫雜質(zhì)時(shí)容易造成孔間交叉污染,。當(dāng)將磁珠法與金標(biāo)準(zhǔn)外泌體分離方法進(jìn)行比較時(shí)，磁珠法可分離出更純凈的外泌體,，特異性高、速度更快,，并且不需要昂貴的儀器。另外,，與其他分離方法相比,，磁珠法不影響外泌體形態(tài),。但是采用磁珠法時(shí),，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)?。┓矫娴臐摿?。外泌體和細(xì)胞外囊泡

外泌體發(fā)現(xiàn)于1986年,，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,，可由機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞如免疫細(xì)胞,、干細(xì)胞,、心血管細(xì)胞,、網(wǎng)織紅細(xì)胞,、血小板,、神經(jīng)細(xì)胞和肉瘤細(xì)胞等主動(dòng)分泌產(chǎn)生,，普遍分布于外周血,、尿液,、唾液,、乳汁,、腹水,、羊水等體液中,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗肉瘤免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體alix通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測腫細(xì)胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo),。

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記,，可用流式細(xì)胞儀檢測到陽性表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)對外泌體的定量,。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測時(shí)需要單顆粒懸浮液,，當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時(shí)將導(dǎo)致一次觀察到多個(gè)顆粒，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。因此,，為了通過流式細(xì)胞儀觀察，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價(jià)結(jié)合固定在磁珠表面上，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中,。在流式細(xì)胞術(shù)之前,，可以在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡。當(dāng)樣品通過流式細(xì)胞儀時(shí)采集熒光信號(hào),，不只可以對外泌體進(jìn)行高通量分析,，還可以基于抗原表達(dá)對外泌體進(jìn)行定量或分類。外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一,，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能,、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)病）方面的潛力,。一個(gè)推測的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,。

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs）,，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中，如腦組織,、肌肉組織,、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片,，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化,，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒,，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束,。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻,，置于冰上,。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過程，包括除雜,、濾膜過濾,、超離等。結(jié)尾用PBS重懸外泌體,，用重懸后的外泌體進(jìn)行下面的透射電鏡（TEM）,、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力,。外泌體alix

外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。外泌體和細(xì)胞外囊泡

全轉(zhuǎn)錄組測序的研究對象為特定細(xì)胞在某一功能狀態(tài)下所能轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA,，主要為mRNA和lncRNA、circRNA等非編碼RNA,。外泌體中攜帶有來自母本細(xì)胞的多種蛋白質(zhì),、脂類、短鏈RNA和長鏈RNA等重要信息,。對外泌體中的長鏈RNA進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組測序及分析,，不只能夠篩選外泌體攜帶的特異Biomarker，同時(shí)對深入了解疾病或不同發(fā)育階段的內(nèi)在機(jī)制也有重要意義,。外泌體全轉(zhuǎn)錄組測序體系,，充分結(jié)合了微量核酸建庫技術(shù)、NGS技術(shù)和全新的生物信息序列比對算法,，可實(shí)現(xiàn)對1mL血漿中的外泌體即可進(jìn)行mRNA,、lncRNA和circRNA等RNAs充分測序，獲取周全的外泌體轉(zhuǎn)錄組信息,。外泌體和細(xì)胞外囊泡

上海宇玫博生物科技有限公司成立于2015-10-16,，同時(shí)啟動(dòng)了以Umibio為主的外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測,，外泌體提取產(chǎn)業(yè)布局,。是具有一定實(shí)力的醫(yī)藥健康企業(yè)之一，主要提供外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測，外泌體提取等領(lǐng)域內(nèi)的產(chǎn)品或服務(wù),。我們強(qiáng)化內(nèi)部資源整合與業(yè)務(wù)協(xié)同,，致力于外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測,，外泌體提取等實(shí)現(xiàn)一體化，建立了成熟的外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測，外泌體提取運(yùn)營及風(fēng)險(xiǎn)管理體系,，累積了豐富的醫(yī)藥健康行業(yè)管理經(jīng)驗(yàn),，擁有一大批專業(yè)人才。上海宇玫博生物科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及一般項(xiàng)目：技術(shù)服務(wù),、技術(shù)開發(fā),、技術(shù)咨詢、技術(shù)交流,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,、技術(shù)推廣；生物基材料技術(shù)研發(fā),；生物基材料銷售,；五金產(chǎn)品批發(fā)；電子元器件批發(fā),；計(jì)算機(jī)軟硬件及輔助設(shè)備批發(fā),；工藝美術(shù)品及收藏品批發(fā)（象牙及其制品除外）；化工產(chǎn)品銷售（不含許可類化工產(chǎn)品）,；實(shí)驗(yàn)分析儀器銷售,；環(huán)境保護(hù)設(shè)備銷售；電力電子元器件銷售,；電子產(chǎn)品銷售,；機(jī)械設(shè)備銷售；儀器儀表銷售,；辦公用品銷售,；塑料制品銷售；橡膠制品銷售,；勞動(dòng)保護(hù)用品銷售,。（除依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目外，憑營業(yè)執(zhí)照依法自主開展經(jīng)營活動(dòng)）許可項(xiàng)目：貨物進(jìn)出口,；技術(shù)進(jìn)出口,。（依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動(dòng),，具體經(jīng)營項(xiàng)目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn)）等多個(gè)環(huán)節(jié),，在國內(nèi)醫(yī)藥健康行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢。在外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測，外泌體提取等領(lǐng)域完成了眾多可靠項(xiàng)目,。