外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等，可作為疾病診斷標(biāo)記物,、調(diào)控靶細(xì)胞功能,、參與細(xì)胞生物學(xué)活動等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)病）方面的潛力,。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）,、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實現(xiàn)的。黑龍江外泌體lncRNA測序

外泌體提取在短時間（一周之內(nèi)）使用,，可以放在4度保存,，如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。也可以將外泌體進行分裝,，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測方法：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進行鑒定。l,、透射電鏡鑒定法：簡稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。2,、納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度快,，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。黑龍江外泌體lncRNA測序外泌體存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。

根據(jù)內(nèi)侵量的不同,，可以產(chǎn)生不同尺寸、不同含量的ILV,。LSEs產(chǎn)生的MVBs具有確定的ILV聚集(未來的外泌體),。MVBs可以與自噬體融合，較終其內(nèi)容物在溶酶體中降解,。降解產(chǎn)物可被細(xì)胞回收利用,。MVBs也可以直接與溶酶體融合降解。不遵循這一軌跡的MVBs可通過細(xì)胞骨架和微管網(wǎng)絡(luò)轉(zhuǎn)運至質(zhì)膜,，借助mvb-?？康鞍淄,？吭谫|(zhì)膜的腔側(cè)。隨后胞吐導(dǎo)致具有與質(zhì)膜相似的脂質(zhì)雙分子層方向的外泌體的釋放,。有幾種蛋白參與了外泌體的生物發(fā)生,，包括RabGTPases、ESCRT蛋白,，以及其他也被用作外泌體標(biāo)記的蛋白(CD9,、CD81、CD63,、flotillin,、TSG101、神經(jīng)酰胺和Alix),。

為什么超速離心提取外泌體看不到沉淀？答：這種問題通常有三種可能性,，其一：使用的細(xì)胞上清或者血清量太低,，從而造成了這樣的結(jié)果。其二：使用了不透明的超速離心管,，一般來說外泌體產(chǎn)量都比較小,，所以凡是不透明的管子，基本都是比較難見到明顯沉淀的,，可以當(dāng)做有沉淀,，然后操作下去即可。其三：使用了角轉(zhuǎn),。部分品牌離心機的角轉(zhuǎn)管壁粘附性比較低,，超離結(jié)束沒多久沉淀就會滑落下去，所以請在離心結(jié)束時趕緊去收樣,。外泌體的角色：1,、外泌體發(fā)揮功能并一定需要受體細(xì)胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。2,、外泌體的角色之一：細(xì)胞-細(xì)胞通訊，比如抗原遞呈,。外泌體發(fā)揮功能方式：細(xì)胞-細(xì)胞之間的通訊,，譬如抗原遞呈，這是發(fā)揮功能的主要方式,。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1,、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進行下一步的實驗,。2、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。3,、色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體,。提取試劑盒生產(chǎn)廠家

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),。黑龍江外泌體lncRNA測序

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液、唾液,、尿液等多種體液中,。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、肉瘤細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷,、療效評價和預(yù)后分析,。黑龍江外泌體lncRNA測序

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