外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細胞分泌,并廣fan存在于血漿,、膽汁、尿液,、母乳,、唾液、胸腔積液,、淋巴,、胃酸、支氣管肺泡灌洗液,、腦脊液,、眼淚、滑膜液,、羊水,、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中,。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù),、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù),、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù),。外泌體能向病變細胞輸送功能性物質(zhì)，所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體,。胸水外泌體circRNA測序

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,，直徑約為30-200nm，形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性,。長鏈非編碼RNA（longnon-codingRNA）是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt,、不編碼蛋白的RNA。近年來的研究表明lncRNA能在標貫遺傳,、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因表達，參與了X染色體沉默,、基因組印記以及染色質(zhì)修飾,、轉(zhuǎn)錄jihuo、轉(zhuǎn)錄干擾,、核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程,，與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。lncRNA芯片對lncRNA進行功能研究也被更多的關(guān)注,，通過設(shè)計不同的lncRNA探針,，可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學(xué)過程中差異表達的lncRNA和mRNA信息,，找到lncRNA的靶基因位點深入分析調(diào)控機制,。細胞外泌體是什么外泌體內(nèi)容物的進入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細胞內(nèi)信號或融合。

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移,、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清,？答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子,，以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能,。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles,，EVs），其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液,、唾液,、尿液,、乳汁等，同時也存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片,，放入離心管中加上消化液進行消化，經(jīng)水浴,、反復(fù)輕輕上下顛倒,，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,，混勻,，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程,，包括除雜,、濾膜過濾、超離等,。結(jié)尾用PBS重懸外泌體,，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定,。神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子,。

血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標志物，也可以進行機理研究,？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進展期和疾病慢性期。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組,，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進展期CLL患者中明顯高表達,，可以作為CLL進展期診斷的輔助標志物。進一步,，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進展期CLL患者外泌體中的高表達蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān),，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路。通過從進展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細胞中,，證實了S100-A9+外泌體能夠明顯促進進展期CLL患者PBMC細胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進一步活躍NF-κB通路。研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進展期CLL的標志物,，并證實了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進展期CLL患者自身PBMC細胞中的NF-κB通路，促進CLL進展的特殊機理,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等。胸水外泌體circRNA測序

外泌體又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白,。胸水外泌體circRNA測序

外泌體可以調(diào)控星狀細胞（HSC）活化,，并參與HSC細胞遷移的進程?；罨腍SC來源的外泌體中,，CCN2表達升高，Twist1和miR-214表達被抑制,，這些外泌體還能誘導(dǎo)靜止的HSC細胞表達CCN2,。此外，Twist1可以誘導(dǎo)miR-214表達從而抑制CCN2的表達,。CCL4處理的外泌體和外泌體SK1/S1P會誘導(dǎo)HSC遷移,。MSC分泌的外泌體可以有效減緩肝纖維化過程，這可能成為肝纖維化治理的靶點,。研究顯示,，CP-MSC來源的外泌體miR-125b可以抑制Hedgehog信號通路的活化，抑制纖維化,；而HUC-MSC分泌的外泌體可以逆轉(zhuǎn)細胞形態(tài)和TGF-β1誘導(dǎo)的EMT進程,，減弱肝纖維化。胸水外泌體circRNA測序

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