外泌體的提取分離方法：1、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。2,、試劑盒提?。航鼛啄陙恚袌錾弦殉霈F(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,，有的是通過特殊設(shè)計的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來,。外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),。肌外泌體提升是什么

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報道,，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質(zhì)干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2,、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制；3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理,；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細胞結(jié)合的途徑。然而,，比較明顯,，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細胞中。細胞上清外泌體PKH26突狀細胞釋放的外泌體可以強化殺傷性T細胞對癥狀細胞的特異性反應(yīng),。

研究者利用電穿孔法對外泌體進行DOX的負載,，進行體內(nèi)抗中流效果的研究。實驗結(jié)果顯示,，負載DOX的iRGD肽靶向性外泌體對中流的抑制效果遠優(yōu)于單純的DOX,。直接靜脈注射DOX，其不僅水溶性低,，而且容易使DOX與血液中的蛋白結(jié)合,，從而被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別捕獲，起不到理想的抗中流效果,。而用iRGD肽靶向性的外泌體保護DOX,，可以提高DOX水溶性，避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉,，提高靶向性,，從而降低由于用藥過量和非靶向性引起的毒性，起到更好的抗中流效果,。

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),，另一方面也可以作為診療手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清？答：血清是血液凝固之后收集的液體,，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子，以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能,。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。高濃度集聚誘導(dǎo)細胞死亡的TNF-α,，可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化。

外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動力學(xué)特性,，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用,。除了它們的診療潛力，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力,。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報道,，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成?；谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價值,。疾病的進展和對診療的反應(yīng)也可以通過外泌體的多組分分析來確定。外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用,，活躍細胞內(nèi)通路,。galnac-l96-ps

隨著EV研究倍受世界矚目，各國啟動了大型研究項目,。肌外泌體提升是什么

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,，主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液、唾液,、尿液等多種體液中,。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中,、肉瘤細胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷,、療效評價和預(yù)后分析,。肌外泌體提升是什么

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