肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長,。據(jù)相關(guān)報道稱,,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進種瘤血管的生成,;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用,。此外,,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,,遷移能力,。科學(xué)家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能,。外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細胞的增殖,、再生和遷移等生理過程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用,。血漿血清提取試劑盒生產(chǎn)廠家
肉瘤細胞可以通過產(chǎn)生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應(yīng)答并促進瘤子細胞的活動而大量產(chǎn)生外泌體,,這些外泌體富含促病的細胞成分,,例如PD-L1、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白,,參與病癥的發(fā)展,、轉(zhuǎn)移和耐藥性。值得注意的是,,肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1,。ESCRT(運輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體)參與將生物分子包裝到外泌體中,nSMase2(中性鞘磷脂酶2)和Rab蛋白調(diào)節(jié)外泌體分泌,。已確定ESCRT,、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞,,并可能與PD-1結(jié)合,。研究外泌體的意義外泌體被認為是疾病的生物標志物和預(yù)后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義,。
外泌體運輸?shù)幕蝾愃幬镆部梢允莔iRNA,,miRNA是一類非編碼的內(nèi)源性RNA,主要用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達,。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區(qū)域(UTRs)結(jié)合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用,。與siRNA不同,miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對,,因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達,,而每種siRNA只針對一種蛋白質(zhì)。miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差,、生物分布不理想,、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體,,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用,。
被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉(zhuǎn)移準備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞重新定向,。外泌體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素(integrin)表達譜,,整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān),而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān),。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取,,進而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移。進一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達,。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測肉瘤轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標,。外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記。
外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細胞來源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過競爭性結(jié)合miR-34/miR-449,,促進晚期腎細胞ai細胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達,,引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運輸至舒尼替尼敏感的ai細胞,,從而傳播舒尼替尼的抗性,。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細胞凋亡,并通過結(jié)合肌動蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1,,APAF1)使得卵巢ai細胞產(chǎn)生對紫杉醇的抗藥性,。外泌體天然存在于體液中,包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。研究外泌體的意義
外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域均起著重要的作用,,并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。血漿血清提取試劑盒生產(chǎn)廠家
超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認為是金標準,,主要是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)、大小和形狀將其分離出來,。首先4℃低速離心(300-500g,,10min)去除死細胞以及細胞碎片,隨后以較高離心速度(2000xg,,10min)去除生物聚合物以及凋亡小體,,然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡,結(jié)尾以超速離心沉淀外泌體,。通過懸浮以及重復(fù)超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白,。超速離心法具有操作簡單、不易被分離試劑污染,、獲得的外泌體數(shù)量較多等優(yōu)點,。但是此方法需要昂貴的超高速離心機,每次處理的樣本量較小,,費時,,電鏡鑒定時還發(fā)現(xiàn)外泌體易聚集成塊,且上清中仍能檢測到大型囊泡,,純度不高,,另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細胞外空間,,并將各種生物活性分子(貨物)轉(zhuǎn)運至靶細胞,。血漿血清提取試劑盒生產(chǎn)廠家
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