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血液外泌體iTRAQ

來源: 發(fā)布時間:2023-06-14

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p,、miR-141-5p和miR-21-5p的表達(dá)水平明顯上升,,表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查,。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流,,發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚,故給早期診斷帶來困難,。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達(dá)的miRNA,,小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,,膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p,、miR-151a-5p、miR-191-5p,、miR-4732-3p明顯升高,,而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高,為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標(biāo)志物,。應(yīng)用Tim4的外泌體強結(jié)合能力,,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體,。血液外泌體iTRAQ

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外泌體研究可以指導(dǎo)診治肝損傷,、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導(dǎo)肝損傷(DILI)大鼠模型中,,尿外泌體中的蛋白含量減少,,包括CD26,、CD81和其他潛在的標(biāo)志物蛋白。而另一項研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,,如HSP70,、HSP90等。MSCs來源的外泌體可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá),,減弱CCL4誘導(dǎo)的肝損傷,。而酒精刺激會促進(jìn)外泌體的分泌,miRNAs水平也會升高,,并促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌,,喚醒單核細(xì)胞的分化。盡管已取得上述成果,,我們對外泌體的研究尚不夠深入,,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應(yīng)用仍有待繼續(xù)探索。囊泡外泌體外泌體提純方法中,,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì),。

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瘤轉(zhuǎn)移是病癥致死的首要原因。長久以來,,對瘤轉(zhuǎn)移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用,。然而在近年來,由于外泌體被發(fā)現(xiàn)可以作為包括瘤在內(nèi)細(xì)胞之間信息傳遞的一種新方式,,瘤轉(zhuǎn)移研究領(lǐng)域再度變得火熱起來,。我所(瘤轉(zhuǎn)移的預(yù)警和預(yù)防研究所)以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉(zhuǎn)移與外泌體之間的聯(lián)系,已取得一系列成果,。外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),,現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。

目前市面上開發(fā)的外泌體提取試劑盒,,是根據(jù)外泌體表面由類似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層具有一定疏水性這一特性,用試劑捆綁水分子,,從而可通過常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體,。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷、樣本需求少,、對設(shè)備要求低,,但與差速離心方法類似,其分離得到的沉淀包含其他細(xì)胞分泌的囊泡,,且血清中含有大量血清蛋白分子,,成分復(fù)雜,,很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質(zhì)。Sabapatha等曾根據(jù)來源于胎盤的外泌體表面特異表達(dá)這一特性,,使用耦合到磁珠的抗抗體,,采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體。此法可以提取的胎盤外泌體量少,,不適用于大規(guī)模提取制備,,且免疫磁珠價格昂貴,不利于提取技術(shù)的普及,。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,。

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所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液,、唾液、尿液,、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究,。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,,參與細(xì)胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂,。研究發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌的exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是mRNA,,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。隨著外泌體研究的不斷深入,,它的應(yīng)用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,。上海外泌體label free

利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果,。血液外泌體iTRAQ

外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液/體液中并介導(dǎo)長距離的細(xì)胞間通訊,中流來源外泌體富含的蛋白質(zhì),、核苷酸,、脂質(zhì)等分子能夠反映其來源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài),外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解,,因此,,檢測中流外泌體成為液體活檢一個明顯優(yōu)勢,。臨床試驗研究表明,外泌體在多種疾病的早期診斷,、療效和預(yù)后監(jiān)測等方面都具備較好的應(yīng)用價值,,正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體,。隨著技術(shù)的進(jìn)步,,組學(xué)時代的到來,大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物,。血液外泌體iTRAQ

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