流式細(xì)胞技術(shù)針對(duì)外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè),,能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小,、折射率低,所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積,、增強(qiáng)反射,,操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM),,將可檢測(cè)的外泌體粒徑降至40nm,,能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測(cè),并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測(cè),,目前該儀器已商品化,。外泌體的提取的方式:PS親和法。一種外泌體的制備及應(yīng)用
在Rameshwar等的研究中,,采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,,使外泌體載有anti-miR-9。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí),,發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不僅可以通過(guò)縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過(guò)外泌體傳遞anti-miR-9,。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對(duì)中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,,顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力,。利用外泌體進(jìn)行GBM的zhiliao不只停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上,也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報(bào)道,。血液外泌體NTA外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA,。
幾乎所有的細(xì)胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產(chǎn)生外泌體,,不同的細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過(guò)程,,如ai癥發(fā)生與發(fā)展,、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié),、組織愈合等,。來(lái)自血細(xì)胞(包括血小板、白細(xì)胞和紅細(xì)胞)的外泌體具有參與凝血、提供促血管生成因子,、誘導(dǎo)血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成,、調(diào)節(jié)分化、激huo免疫,、促進(jìn)胚胎發(fā)育;肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體有利于維護(hù)肝臟內(nèi)穩(wěn)態(tài),。由此可見(jiàn),正常細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體對(duì)維持機(jī)體的正常生命活動(dòng)起重要作用,。
外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用,。外泌體通過(guò)內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達(dá),將信息傳遞給靶細(xì)胞,。盡管干細(xì)胞移植治理是一種很有前景的修復(fù)損傷心臟組織并使其再生的輔助手段,,但由于缺血心臟中移植細(xì)胞的存活狀況不佳,一般只能觀察到心臟功能的輕度改善,。近期的研究表明,,干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心臟修復(fù)潛在的無(wú)細(xì)胞治理劑。干細(xì)胞分泌的外泌體相比干細(xì)胞有如下優(yōu)點(diǎn):(1)旁分泌效應(yīng),,外泌體作為干細(xì)胞旁分泌作用的一種媒介,;(2)組合起效,外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進(jìn)行組合,;(3)個(gè)性化,,外泌體可改造特定活性成分;(4)靶向特異性,,外泌體被工程化改造后,,具有靶向特定細(xì)胞類(lèi)型或組織的功能;(5)安全性高,,外泌體治理屬于無(wú)細(xì)胞療法,。外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細(xì)胞類(lèi)型或組織的功能,。
外泌體(exosomes)是一類(lèi)由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡,。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產(chǎn)生方式,、尺寸,、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,,外泌體主要通過(guò)胞吐過(guò)程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes),,早期核內(nèi)體進(jìn)一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),,其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,,進(jìn)而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外,,即為外泌體,。外泌體具有獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),其直徑為30~200nm,,密度為1.13~1.19g/mL,,組成包括細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì),、RNA,、DNA等物質(zhì),在其表面連接有大量的糖鏈,,如甘露糖,、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等,。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,,同時(shí)外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會(huì)分解。一種外泌體的制備及應(yīng)用
外泌體能夠穿過(guò)血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì),。一種外泌體的制備及應(yīng)用
雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟,、腎臟和脾臟中積累,但通過(guò)在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子,。例如,,識(shí)別靶抗原的肽或抗體片段,可以獲得靶向外泌體,;通過(guò)在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定的納米抗體,,可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白,包括抗體,、熒光蛋白和信號(hào)分子,。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限,但是,,將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中,,并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力。一種外泌體的制備及應(yīng)用
上海宇玫博生物科技有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā),、生產(chǎn),、銷(xiāo)售相結(jié)合的生產(chǎn)型企業(yè)。公司成立于2015-10-16,,自成立以來(lái)一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進(jìn)相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略,。本公司主要從事外泌體提取試劑盒,外泌體,,外泌體檢測(cè),,外泌體提取領(lǐng)域內(nèi)的外泌體提取試劑盒,,外泌體,外泌體檢測(cè),,外泌體提取等產(chǎn)品的研究開(kāi)發(fā),。擁有一支研發(fā)能力強(qiáng)、成果豐碩的技術(shù)隊(duì)伍,。公司先后與行業(yè)上游與下游企業(yè)建立了長(zhǎng)期合作的關(guān)系,。Umibio致力于開(kāi)拓國(guó)內(nèi)市場(chǎng),與醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長(zhǎng)期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系,,公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務(wù),,獲得客戶(hù)及業(yè)內(nèi)的一致好評(píng)。上海宇玫博生物科技有限公司以先進(jìn)工藝為基礎(chǔ),、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,、以技術(shù)創(chuàng)新為動(dòng)力,開(kāi)發(fā)并推出多項(xiàng)具有競(jìng)爭(zhēng)力的外泌體提取試劑盒,,外泌體,,外泌體檢測(cè),外泌體提取產(chǎn)品,,確保了在外泌體提取試劑盒,,外泌體,外泌體檢測(cè),,外泌體提取市場(chǎng)的優(yōu)勢(shì),。