外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比,，病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體,。(2)由于特殊的生成方式,，外泌體的組成不同于來源細胞,。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運輸方式,，有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制,。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液,，囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶,、磷酸酶、核酸酶等干擾,，有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,，通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。結(jié)果表明,，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA,。細胞上清外泌體Dil

外泌體在心臟修復中起著關(guān)鍵作用。外泌體通過內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達,，將信息傳遞給靶細胞,。盡管干細胞移植治理是一種很有前景的修復損傷心臟組織并使其再生的輔助手段，但由于缺血心臟中移植細胞的存活狀況不佳,，一般只能觀察到心臟功能的輕度改善,。近期的研究表明，干細胞釋放的外泌體可以作為心臟修復潛在的無細胞治理劑,。干細胞分泌的外泌體相比干細胞有如下優(yōu)點：（1）旁分泌效應,，外泌體作為干細胞旁分泌作用的一種媒介；（2）組合起效,，外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進行組合,；（3）個性化，外泌體可改造特定活性成分,；（4）靶向特異性,，外泌體被工程化改造后，具有靶向特定細胞類型或組織的功能,；（5）安全性高,，外泌體治理屬于無細胞療法,。大通量外泌體自動提取設(shè)備外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞,，并可能與PD-1結(jié)合。

外泌體開始被認為是細胞排出代謝廢物的一種方式,，能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統(tǒng)的細胞排出不必要的蛋白質(zhì)和RNA,。近年來，隨著人們對外泌體的深入了解,，外泌體的多種生物功能先后被發(fā)現(xiàn),。如今外泌體作為一種細胞間交流,、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現(xiàn):(1)外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細胞表面的受體識別,，從而激huo靶細胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,，將蛋白質(zhì)和RNA等內(nèi)容物釋放進去，此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,，例如脂質(zhì)和膜蛋白質(zhì)的密度及種類;(4)目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體,。

目前，在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn),，外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色,。外泌體還越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義,。除此之外,，它們還有潛力被用于臨床，作為基因和藥物遞送的載體,。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質(zhì)成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中,，因其特殊性，外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測,。例如,，從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預后的指標,。外泌體的復雜性,，為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口。

外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào),，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關(guān),。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍。腦脊液外泌體染色

外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應答。細胞上清外泌體Dil

研究采用蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀,，極大地降低了外泌體的提取成本,，且獲得的外泌體不僅表達外泌體公認的標志蛋白分子，同時也表達胎盤特異性蛋白分子,，證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體,。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳，銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,，動態(tài)光散射分析粒徑,，結(jié)果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間，與文獻報道外泌體顆粒大小相一致,。胎盤外泌體經(jīng)過PKH67熒光染料染色后,，與細胞共孵育，熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進入細胞的活性,，進一步驗證了我們應用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體,。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體，并從蛋白標志分子,、電鏡,、粒徑及分布、進入細胞活性四方面對其進行了鑒定,，為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎(chǔ),。細胞上清外泌體Dil

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