外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡,，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。一開始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物，但是近幾年,，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用,。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個(gè)巨大挑戰(zhàn),。發(fā)表于NanoLett的一項(xiàng)研究中,，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功,。在這項(xiàng)研究中,，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上，細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體,，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級納米囊泡,，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后,，受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子,，再破壞鄰近的病細(xì)胞。研究顯示,，LD-MDS對體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率,，并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,，改善神經(jīng)預(yù)后,，增加血管與神經(jīng)生成。外泌體霧化的好處

瘤在生長過程中會不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去,，同時(shí),，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長時(shí)間,，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷,。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域,，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA,、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者,，通過檢測MIA和S100B表達(dá)水平對黑色素瘤的診治具有積極地參照作用,。從本質(zhì)上說，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸,，進(jìn)一步豐富了檢測手段,，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來越重要的作用,。菲瑪吉外泌體外泌體被工程化改造后,，具有靶向特定細(xì)胞類型或組織的功能。

外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,，成熟于多囊泡胞內(nèi)體,，終于膜融合。細(xì)胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome）,，在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下,，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB）,，這個(gè)過程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles,，ILVs）會裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合,。隨后,，這些小囊泡會被釋放到細(xì)胞外，稱為外泌體,。外泌體是通過細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動排除的物質(zhì),，大小均勻，而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成,，大小不均一,。

外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破，要將其用于臨床治理,，外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn),。外泌體（exosome）是細(xì)胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一種亞型，存在于生物體液中,，并參與多種生理和病理過程,。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間通信的一種新機(jī)制，允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì),、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì),。過去，細(xì)胞分泌的外泌體一度被認(rèn)為只是參與廢物排泄,；現(xiàn)在,，隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展，外泌體被寬泛認(rèn)為是生物體內(nèi)細(xì)胞間短距離和長距離交流的高度保守的途徑,，這種細(xì)胞間通信對于正常細(xì)胞和瘤細(xì)胞都是非常重要的,。實(shí)際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體,。

流式細(xì)胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測,，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析,。但是由于外泌體的粒徑小,、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積,、增強(qiáng)反射,，操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM),，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,，能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測,，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化,。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體,。遼寧鼻腔灌洗液外泌體

在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切,，碎片作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,，喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號通路,。外泌體霧化的好處

血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定,將血清在4°C短期保存期間即發(fā)生降解,這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的,。–80°C保存被公認(rèn)是保存各種生物標(biāo)本如尿、牛奶,、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境,雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體,。4°C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環(huán)境下,但在處理或運(yùn)輸過程中有時(shí)很難維持這種低溫條件,。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過程中使用海藻糖作為保護(hù)劑,海藻糖可以提供生物保護(hù)作用,如穩(wěn)定蛋白質(zhì),、細(xì)胞膜和脂質(zhì)體;減少冷凍過程中冰的形成;防止蛋白質(zhì)以及外泌體的聚集;減少分離和保存過程中細(xì)胞外囊泡的損失等。外泌體霧化的好處

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