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科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。例如,,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體,,高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α,可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化,。通過上述介紹可以知道癥狀細(xì)胞來源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子,,神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子,因此,,通過壓制或去除這些外泌體,,有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展,,外泌體功能逐步清晰,,并擴(kuò)大臨床應(yīng)用,有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上,。甚至可嘗試?yán)猛饷隗w將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中,。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。組織外泌體攝取
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達(dá)譜有明顯差異,,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標(biāo)志物,。多項(xiàng)研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理?xiàng)l件下過度表達(dá)。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關(guān)的各種細(xì)胞,,包括腎小球足細(xì)胞,、腎小管細(xì)胞和膀胱等,因此尿液外泌體數(shù)目,、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標(biāo)志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),,表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力,。b細(xì)胞外泌體干細(xì)胞外泌體通過改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,,生長,,增殖和分化途徑。
外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的增殖過程,。瘤細(xì)胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖,,而外泌體(Exosome)可以充當(dāng)這種信息載體。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)基因突變時(shí),,外泌體(Exosome)會(huì)通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細(xì)胞,,從而導(dǎo)致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達(dá),,使瘤細(xì)胞獲得增殖特性,。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細(xì)胞,促進(jìn)瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視,,為瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件,。然而,雖然當(dāng)前外泌體生物學(xué)仍然不成熟,,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床轉(zhuǎn)化,。
外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,,終于膜融合,。細(xì)胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體(earlyendosome),,在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下,,早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),,這個(gè)過程中這些腔內(nèi)小囊泡(intraluminalvesicles,,ILVs)會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子,泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合,。隨后,,這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外,稱為外泌體,。外泌體是通過細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì),,大小均勻,而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成,,大小不均一,。外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細(xì)胞的增殖、再生和遷移等生理過程,,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用,。
姜黃素的臨床應(yīng)用也存在著問題,比如其水溶性差,在體內(nèi)代謝快速以及易被快速清chu,。利用鼠淋巴瘤細(xì)胞系(EL-4)的外泌體作為姜黃素的載體,,可以提高姜黃素的溶解性、穩(wěn)定性以及生物利用度,,將姜黃素和載有姜黃素的外泌體腹膜內(nèi)注射到脂多糖(LPS)誘發(fā)的敗血性休克的小鼠模型中,,結(jié)果顯示經(jīng)外泌體運(yùn)載的姜黃素可促進(jìn)小鼠肺部抑制免疫反應(yīng)的CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡而表現(xiàn)出抗yan癥的效果,而單純姜黃素的注射不能起到促進(jìn)CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡效果(與注射PBS的對照組類似),。研究者還進(jìn)行了目前常用的脂質(zhì)體負(fù)載姜黃素,,與外泌體負(fù)載姜黃素對比。脂質(zhì)體和外泌體均具備作為姜黃素的載體的能力,,但外泌體由于其更易被Gr-1+細(xì)胞吞噬,,從而可以起到更好的zhiliao效果。神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子,。遼寧外泌體NTA
外泌體的遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān),,在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。組織外泌體攝取
研究采用蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀,,極大地降低了外泌體的提取成本,,且獲得的外泌體不僅表達(dá)外泌體公認(rèn)的標(biāo)志蛋白分子,同時(shí)也表達(dá)胎盤特異性蛋白分子,,證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體,。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳,銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,,動(dòng)態(tài)光散射分析粒徑,,結(jié)果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間,與文獻(xiàn)報(bào)道外泌體顆粒大小相一致,。胎盤外泌體經(jīng)過PKH67熒光染料染色后,,與細(xì)胞共孵育,熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進(jìn)入細(xì)胞的活性,,進(jìn)一步驗(yàn)證了我們應(yīng)用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體,。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體,并從蛋白標(biāo)志分子,、電鏡,、粒徑及分布、進(jìn)入細(xì)胞活性四方面對其進(jìn)行了鑒定,,為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎(chǔ),。組織外泌體攝取
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