細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡,。這些細(xì)胞外囊泡（EVs）表示了細(xì)胞間通訊的一個重要模式,，作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體,。泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡,，由大多數(shù)細(xì)胞分泌,。在抗原呈遞細(xì)胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強,，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答,。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細(xì)胞類型的外泌體分泌,，并討論了其潛在的生物學(xué)功能,。然而，我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索,。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成,、定位和功能的機制。外泌體具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,，可用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測,。干細(xì)胞提取試劑盒生產(chǎn)廠家

外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過競爭性結(jié)合miR-34/miR-449,，促進晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá),，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞,，從而傳播舒尼替尼的抗性,。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡，并通過結(jié)合肌動蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1,，APAF1)使得卵巢ai細(xì)胞產(chǎn)生對紫杉醇的抗藥性,。外泌體應(yīng)用目前,，提取外泌體的方法主要有超速離心法,、PEG沉淀法。

中流細(xì)胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官,，建立有利于ai細(xì)胞生長的微環(huán)境,，包括促進受體細(xì)胞上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、引發(fā)炎癥,、促進血管生成,，為ai細(xì)胞的擴散形成有利條件。進一步研究發(fā)現(xiàn)中流細(xì)胞外泌體能夠引導(dǎo)ai癥轉(zhuǎn)移至特定qi官,，在膜表面特異性整合素的作用下,，中流細(xì)胞外泌體首先在特定的qi官累積，引起受體qi官產(chǎn)生炎癥,、生成血管,，形成有利于中流轉(zhuǎn)移的微環(huán)境，使得中流細(xì)胞更容易轉(zhuǎn)移至該qi官,。Maji等揭示了惡性中流細(xì)胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成,，為中流轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利的微環(huán)境,。

外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA,、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細(xì)胞具有交換信息的功能,。作為細(xì)胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍,，但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù),，關(guān)于需要改進的課題存在很多。例如,，外泌體提純方法中,，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)，給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙,?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體,，但不能提取完整外泌體,，無法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問題所在,。而免疫印跡法（WB）和Elisa檢測法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測的一般方法,，又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,，改善神經(jīng)預(yù)后,，增加血管與神經(jīng)生成。

為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture?ExosomeIsolationKitPS）提取高純度細(xì)胞外囊泡,。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）,。另外,，T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4（Tim4通過巨噬細(xì)胞進行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）?；谏鲜鲋R,，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,，再添加螯合劑洗脫外泌體,，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā),，并取得了成功,。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法,。在從體液中提取外泌體后,，體液可長期穩(wěn)定保存。外泌體應(yīng)用

干細(xì)胞外泌體可以有效活化提高細(xì)胞能量加速細(xì)胞排毒,、淡化色斑,。干細(xì)胞提取試劑盒生產(chǎn)廠家

Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞，使其分泌的外泌體負(fù)載miR-146b,，并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處,。結(jié)果表明，這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長,。對于GBM類腦部中流,，體內(nèi)zhiliao不同于體外細(xì)胞實驗，更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響,，外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效,。然而，至今還沒有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報道,，這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題,。盡管如此，Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,，因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景,。干細(xì)胞提取試劑盒生產(chǎn)廠家

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