微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺,這些方法包括免疫親和分離,、膜過濾,、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側向位移分選等,。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網絡組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升范圍內的黏性介質樣品;且根據(jù)特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調流體運動,。微流控技術能夠以極高的準確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實驗室過程,取代昂貴的設備,基于微流控技術的電化學外泌體檢測芯片已經受到廣fan關注。高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,，可使類風濕關節(jié)炎惡化,。植物外泌體融合實驗

通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細胞培養(yǎng)液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體,。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質分子的相互結合力,從而迫使其脫離溶液,進而在低速離心條件下發(fā)生沉降,。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結合蛋白,可通過與外泌體質膜糖蛋白上的糖鏈結合來改變外泌體的溶解性,。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉,、有機溶劑沉淀等方法進行沉淀分離,。成都外泌體western blot建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。

外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調,，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關,。

要使外泌體在臨床上得以更加廣fan的應用，仍然需要更加深入的研究:(1)外泌體的提純方式主要是超速離心,，這種提純方式效率較低,，耗費時間長并且相對昂貴，并不適宜在臨床上應用,。(2)外泌體雖然具有一定的靶向性,，但這種靶向性較弱，不足以解決中流的靶向zhiliao問題,。通過在外泌體表面表達特異性肽的方法可以為上述問題的解決提供較為有效的途徑,。(3)在外泌體的載藥fang式方面,，現(xiàn)在常用的電穿孔法雖更具優(yōu)勢,，但往往會對外泌體或藥物的完整性產生影響，轉染外泌體法不能保證基因類藥物全部進入外泌體內而不是粘附在外泌體表面,，存在著安全隱患,。(4)外泌體作為細胞分泌物質，其本身可調性并不如脂質體以及聚合物基藥物載體,。外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,，快速直達基底層起效。

血清和血漿為常規(guī)檢測樣本,，具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點,，是診斷疾病的理想樣本,。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai,、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物,。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠實現(xiàn)胰腺ai早期診斷,，利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測,，能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例),?；顑鹊耐饷隗w動態(tài)（哪個外泌體遷移至何處）也會成為今后需要努力研究的重要課題。血漿外泌體提取方法

神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,。植物外泌體融合實驗

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中?，F(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中,。植物外泌體融合實驗

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