外泌體運輸?shù)幕蝾愃幬镆部梢允莔iRNA，miRNA是一類非編碼的內(nèi)源性RNA,，主要用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達,。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區(qū)域(UTRs)結(jié)合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同,，miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對,，因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達，而每種siRNA只針對一種蛋白質(zhì),。miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差,、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等,。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體,，并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中,，雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物，使外泌體能夠在組織中長距離移動,。細胞上清外泌體提取試劑盒原理

在運輸DOX的研究中,，Wei等選擇了已經(jīng)在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞，通過化學(xué)轉(zhuǎn)染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,，這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結(jié)合,，使外泌體對DOX的運輸具有靶向性。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經(jīng)靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,，并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內(nèi),，觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經(jīng)出現(xiàn)在中流組織處，在注射2h后外泌體的含量高,，而未經(jīng)靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,，幾乎很少到達中流組織處，說明對iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性,。細胞上清外泌體提取試劑盒原理外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較,。

膜封閉的囊泡釋放到周圍環(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來越來越受關(guān)注的問題,。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起。但是,，也已經(jīng)清楚,，不同類型的分泌囊泡共存，具有不同的細胞內(nèi)起源和形成模式,，因此可能具有不同的組成和功能,。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們在真核細胞內(nèi)的多泡小體中形成,，并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時分泌到細胞外,。有趣的是，不同的分子家族已被證明參與細胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌,，這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型,。

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞,，期望開發(fā)利用該特征的新型DDS,。外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解,。另外在從體液中提取外泌體后,，體液可長期穩(wěn)定保存，因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標記,。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,，特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,，其與正常細胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,，并作為癥狀早期診斷技術(shù),，應(yīng)用于與癥狀進展相關(guān)的研究,。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟,、前列腺疾病,、膀胱疾病的新型診斷標記,，髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物,。實際上,，用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體,。

外泌體調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細胞的機能，延長毛發(fā)根部的囊生長期,，同時活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊,，使其提前進入新的生長周期，實現(xiàn)了毛發(fā)的再次生長,。骨衰老小鼠注射外泌體試驗證明：年輕血液中的外泌體同樣使衰老的組織重新煥發(fā)生機,。來源于脂肪組織中的干細胞分泌一些信號分子和生長因子，可以促使控制毛發(fā)根部的囊生長周期的毛發(fā)根部的囊干細胞進行分化,，向上遷移生成表皮細胞和皮脂腺,，向下遷移生成毛母細胞,。毛發(fā)根部的囊的生長周期決定毛發(fā)的生長周期，而毛發(fā)根部的囊干細胞的機能決定了毛發(fā)根部的囊的活躍程度,，外泌體靶向調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細胞的功能,。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍。安徽外泌體miRNA芯片

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,。細胞上清外泌體提取試劑盒原理

密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù),。該方法需預(yù)先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等,，在離心管中構(gòu)筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶,。根據(jù)密度梯度構(gòu)建和沉降方式的不同,又可以分為速率區(qū)帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據(jù)顆粒的沉降速率分離,介質(zhì)密度均小于外泌體密度,離心時樣品在向超速離心管底部移動時,會通過密度不斷增加的密度梯度區(qū)帶,密度大的顆粒更容易穿過密度更高的梯度層,更快地到達管底,因此控制離心的時間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區(qū)帶,則會根據(jù)樣品液中各種溶質(zhì)成分來進行組合,離心過程中,無論離心時間多久,不同密度顆粒jin會富集到具有相同密度的梯度區(qū)帶,而不會沉淀到底部。細胞上清外泌體提取試劑盒原理