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血漿外泌體PKH67

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-09-24

流式細(xì)胞技術(shù)針對(duì)外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè),,能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量,、多通道分析,。但是由于外泌體的粒徑小,、折射率低,,所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積,、增強(qiáng)反射,,操作耗時(shí)又費(fèi)力,。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM),,將可檢測(cè)的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測(cè),,并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測(cè),,目前該儀器已商品化。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型,。血漿外泌體PKH67

血漿外泌體PKH67,外泌體提取試劑盒

外泌體的提取方法:超速離心法,,這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多,,但是純度不足,,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),,也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡而不是外泌體,。過(guò)濾離心法,這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí),,不會(huì)影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。密度梯度離心法,,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期的準(zhǔn)備工作繁雜,,比較耗時(shí),,量少。血清外泌體Dir外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有重要的作用,。

血漿外泌體PKH67,外泌體提取試劑盒

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),,參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié),、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用,。而很多妊娠并發(fā)癥,,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤來(lái)源外泌體異常密切相關(guān),。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心,、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀,、免疫磁珠分選、色譜法,、過(guò)濾離心等方法,。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái),,然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,,如樹突狀細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,,這些因素都會(huì)影響胎盤來(lái)源外泌體的分離純化,。

外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子,,這些分子具有來(lái)源細(xì)胞的特異性,,所以通過(guò)分析中流細(xì)胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來(lái)源細(xì)胞表型及其生物學(xué)作用。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來(lái)源的蛋白類分子標(biāo)志物,。例如,,乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測(cè)到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,,GPC1)的表達(dá),,且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比,GPC1對(duì)胰腺ai的早期診斷尤具價(jià)值,。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達(dá)增高則提示與中流進(jìn)展相關(guān),。隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來(lái)源的蛋白標(biāo)志物其診斷特異性和敏感性分別可達(dá)到95%和90%,。外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用,。

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外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,要將其用于臨床治理,,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn),。外泌體(exosome)是細(xì)胞分泌囊泡(extracellularvesicles)的一種亞型,,存在于生物體液中,并參與多種生理和病理過(guò)程,。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間通信的一種新機(jī)制,,允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì),。過(guò)去,,細(xì)胞分泌的外泌體一度被認(rèn)為只是參與廢物排泄;現(xiàn)在,,隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展,,外泌體被寬泛認(rèn)為是生物體內(nèi)細(xì)胞間短距離和長(zhǎng)距離交流的高度保守的途徑,這種細(xì)胞間通信對(duì)于正常細(xì)胞和瘤細(xì)胞都是非常重要的,。外泌體研究相對(duì)困難,,需要盡快開發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù),。血漿外泌體PKH67

外泌體無(wú)法分析外泌體具有的生理功能,,也是兩種提取方法的問(wèn)題所在。血漿外泌體PKH67

姜黃素的臨床應(yīng)用也存在著問(wèn)題,,比如其水溶性差,,在體內(nèi)代謝快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤細(xì)胞系(EL-4)的外泌體作為姜黃素的載體,,可以提高姜黃素的溶解性,、穩(wěn)定性以及生物利用度,將姜黃素和載有姜黃素的外泌體腹膜內(nèi)注射到脂多糖(LPS)誘發(fā)的敗血性休克的小鼠模型中,,結(jié)果顯示經(jīng)外泌體運(yùn)載的姜黃素可促進(jìn)小鼠肺部抑制免疫反應(yīng)的CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡而表現(xiàn)出抗yan癥的效果,,而單純姜黃素的注射不能起到促進(jìn)CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡效果(與注射PBS的對(duì)照組類似)。研究者還進(jìn)行了目前常用的脂質(zhì)體負(fù)載姜黃素,,與外泌體負(fù)載姜黃素對(duì)比,。脂質(zhì)體和外泌體均具備作為姜黃素的載體的能力,但外泌體由于其更易被Gr-1+細(xì)胞吞噬,,從而可以起到更好的zhiliao效果,。血漿外泌體PKH67

標(biāo)簽: 外泌體提取試劑盒