要使外泌體在臨床上得以更加廣fan的應(yīng)用,,仍然需要更加深入的研究:(1)外泌體的提純方式主要是超速離心,這種提純方式效率較低,,耗費時間長并且相對昂貴,,并不適宜在臨床上應(yīng)用。(2)外泌體雖然具有一定的靶向性,,但這種靶向性較弱,,不足以解決中流的靶向zhiliao問題。通過在外泌體表面表達特異性肽的方法可以為上述問題的解決提供較為有效的途徑,。(3)在外泌體的載藥fang式方面,,現(xiàn)在常用的電穿孔法雖更具優(yōu)勢,但往往會對外泌體或藥物的完整性產(chǎn)生影響,,轉(zhuǎn)染外泌體法不能保證基因類藥物全部進入外泌體內(nèi)而不是粘附在外泌體表面,,存在著安全隱患。(4)外泌體作為細胞分泌物質(zhì),,其本身可調(diào)性并不如脂質(zhì)體以及聚合物基藥物載體,。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍。吉林外泌體PKH67
由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,,外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢,。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應(yīng),從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,,其體積小,,結(jié)構(gòu)、組成與細胞膜類似,,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部,,有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,,某些細胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,,可以與特定的qi官或組織結(jié)合。湖南CD9外泌體慢病毒外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,。
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);參與細胞之間的交流,,物質(zhì)的運輸以及正常生理過程的維持,,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對分離的外泌體進行體外標(biāo)記或示蹤,,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究,。目前對于外泌體的標(biāo)記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等,。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天,。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,,標(biāo)記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上,。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同,;細胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會影響外顯體的含量及其生物學(xué)標(biāo)記,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質(zhì)樣細胞,;由于細胞表面受體表達的不同,,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細胞存活,,也可能誘導(dǎo)凋亡,,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,,包括它們是否來自病細胞,,瘤細胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,,特別是血液中釋放的病細胞來源的外泌體,。
外泌體本身的惰性相當(dāng)高,但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學(xué)功能,,因此,,外泌體是納米藥物遞送或基因治理的潛在載體,。外泌體作為功能性小RNA和蛋白質(zhì)的天然載體也引起了藥物遞送領(lǐng)域的極大興趣,因為它可以利用這些囊泡治理性遞送各種核糖核酸分子,、肽和合成藥物,。外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,,要將其用于臨床治理,,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)還面臨很大的挑戰(zhàn)。首先,,對外泌體的具體合成機制,、功能了解并不是非常詳細。其次,,現(xiàn)在缺乏經(jīng)濟有效的外泌體分離技術(shù),。隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項目,。江蘇外泌體熒光標(biāo)記
外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷,,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,終于膜融合,。吉林外泌體PKH67
外泌體是由細胞細胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過胞吐方式主動分泌到細胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡,,其形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu),,不同類型細胞分泌的外泌體具有很多共性,,包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白,如四次跨膜蛋白家族成員CD63,、CD81等,,表面為類似于細胞膜的脂質(zhì)雙分子層,具有一定的疏水性,。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs),、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子,,并在細胞外環(huán)境穩(wěn)定存在,,而且通過傳遞供體細胞信息,調(diào)節(jié)靶細胞的代謝通路,。外泌體可由多種類型細胞分泌,,妊娠期母體血清中存在表達胎盤堿性磷酸酶(placentalalkalinephosphatase,)的胎盤來源外泌體,并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用,。吉林外泌體PKH67